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生化2011-11-4

5’ DnaB SSB DnaA DnaC 含有解螺旋酶(DnaB)、DnaC、引物酶(DnaG)和起始序列(OriC)的复合结构称为引发体:DnaB-DnaC-DnaG--OriC。 2. 引发体的形成 3’ DnaG →SSB及DnaG OriC 5’ 3’ 5’ DnaB SSB DnaC DnaG 3. 引物的形成 OriC HO- 3’ NTP DnaA P5’ 3’ 5’ TOP DnaB SSB DnaA DnaC DnaG 4. (前导链)复制的延长 OriC 3’ DNA-Pol Ⅲ dNTP NTP DNA-Pol Ⅲ 、TOP P5’ 3’ 5’ TOP DnaB SSB DnaA DnaC DnaG 5. (随从链)复制的延长 OriC 3’ DNA-Pol Ⅲ 3’ 5’ DNA-Pol Ⅲ DnaG dNTP NTP DNA-Pol Ⅲ 、TOP * DNA的生物合成 (复制) 复制的化学实质——dNMP的聚合反应:由DNA聚合酶催化,模板DNA(母链)指导,按照互补配对,在子链3?-OH端加入dNMP。 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 3’ 游离dNTP 5’ P -OH A C G T T G C A HO- 5’ P P P P P P P 3’ PPP T PPP A PPP G C PPP DNA聚合酶 母链 子链 dNMP 第一节 DNA的生物合成(复制)的特点 复制的特点: 半保留复制 双向复制 半不连续复制 DNA的生物合成的方式:复制、修复和逆转录 一、半保留复制 概念: DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板,按碱基配对规律,合成与模板互补的子链,其特点: 1.两个子代细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。 2.子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全重新合成。 半保留,半非保留(重新合成) + 母链DNA 形成复制叉 子代DNA Ori 二、双向复制 起始点(Ori): DNA复制起始处的特定核苷酸序列。 复制从ori开始,同时向两个方向进行,称为双向复制。 1.真核生物的复制 复制子:从一个Ori起始复制的DNA片段,是独立完成复制的功能单位。 真核生物有多个复制起始点,是多复制子复制。 5’ 3’ 3’ 5’ ori ori ori 5’ 3’ 3’ 5’ 复制子 2.原核生物的复制 原核生物只有一个Ori ,复制时,DNA从Ori向两个方向解链,形成两个方向相反的复制叉,最后在终止点(ter)会合,是单复制子复制。 ori ter dNTP DNA聚合酶 三、半不连续复制 ㈠复制的方向:5’→3’, 由DNA聚合酶决定的。 1.前导链:复制方向与解链方向一致而 连续合成的子链。 5’ 5’ dNTP DNA聚合酶 2.随从链:复制方向与解链方向相反而分段合成的子链 。 5’ 3’ 3’ 5’ 冈崎片段 冈崎片段:复制中,分段合成的片段。 前导联 随从链 参与DNA复制的物质 1.底物: dNTP(A、G、C、T)及NTP(A、G、C、U) 2.与解链有关的酶或蛋白质因子: 解螺旋酶、拓扑异构酶和单链DNA结合蛋白 3.模板: 解开成单链的DNA母链 4.引物:复制起始时提供3?-OH末端的RNA短片段 5.引物酶: 催化RNA引物合成 6.DNA聚合酶: DNA-pol 7.DNA连接酶: 连接缺口。 第二节 DNA复制所需物质 一、DNA聚合酶(DNA-pol) 所有DNA-pol都有以下活性: ⑴5?→3?的聚合活性 ⑵对碱基的选择活性 ⑶3?→5?核酸外切酶活性 ①3?→5?外切酶活性: 能辨认错配的碱基,并将其水解。 ②5?→3?外切酶活性:能切除突变的DNA片段。 核酸外切酶活性 3′ A G C T T C A G G A T A 5′ 5′ T C G A A G

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