[农林牧渔]13转基因动物及克隆动物讲座.pptVIP

第十三章 转 基 因 动 物 及克隆动物讲座 转 基 因 动 物 13.1 转基因动物的定义如下： 转基因动物（transgenic animal）： 通过基因工程技术将目的基因导入生殖细胞、早期胚胎干细胞和早期胚胎，并整合到受体细胞的基因组中，它们经过各种发育途径形成所有细胞都包含目的基因的个体，称转基因动物（也称个体表达系统）。 13.3 受精卵原核显微注射法 用显微注射法把外源基因注入受精卵雄原核内，获得转基因动物的方法。 受精卵原核显微注射是研究转基因动物最早、最普遍采用的方法，也是最成熟的方法。该方法的要点是目的基因的构建和显微注射两个步骤。 1966年，发现了DNA连接酶。1970年Smith和Wilcox在流感嗜血杆菌中分离并纯化了限制性内切酶 Hind Ш，使DNA分子的切割成为可能。1979年，Bltimore和Temin领导的两个研究小组分别在各自的工作中发现了逆转录酶。 1972年，美国斯坦福大学博格（Berg）研究小组利用限制性内切酶EcoR I 和T4 DNA连接酶成功地进行了首例体外基因重组实验。 限制性内切酶 基因的针线——DNA连接酶 13.3.1 目的基因的构建 目的基因的构建是一个重要方面，它的结构直接影响基因整合的效率。 有实验证明，线状DNA的整合率大约是环状DNA的5倍，而粘性末端的DNA比平齐末端DNA有更大的优点。 这种方法看起来虽然简单，实际上操作起来技术性很强，即使是受过严格训练的专业人员操作，发育成转基因动物的受精卵也只占注射受精卵的5％(图6-3)。因此人们往往采用增大微注射受精卵的数目的办法来弥补这一缺陷。 13.4 转基因动物的应用 ① 在基因表达调控研究方面的应用:利用转基因动物可作为在体内研究外源基因表达调控的“反应器”。 用于基因产品的制备:在转基因动物中，导入的目的基因表达，人们就可以从该动物的乳汁和血液里获得目的基因产物。 动物品种的培育与改良:把具有优良性状的基因或抗病基因导入畜禽以培育新的品种. ④ 进行功能基因组学的研究:研究外源基因在动物整体水平的表达调控规律。 ⑤ 转基因动物疾病模型可用来进行疾病发病学和治疗性研究。 转基因动物实例一 转基因动物实例二 转基因动物实例三 转基因动物实例四 just a joke 尚待解决的问题 转基因动物的成功率较低。 目的基因在宿主染色体的整合及其特异性表达问题。 产品纯化问题。 安全性问题。 克　隆　动　物 These female pigs are also cloned. 2001. The worlds first cloned cat. 2002 13.7 克隆技术的应用前景 Application of Cloning Clone animal 　动物克隆 Saving endangered species　濒于灭绝的物种克隆 To answer questions of basic biology 解决基本的生物性问题 For pharmaceutical production　用于制药工程 For herd improvement　家畜的改良 For human :Therapeutic cloning 　为人类的治疗性克隆 Replacing organs and other tissues　器官及组织移植 Gene therapy　基因治疗 Clone Human Infertility　减肥 Replacing a lost child　复制丢失的小孩 Creating donor people　产生捐赠者 the first clone of an endangered animal (2001), a baby bull gaur印度野牛 Therapeutic cloning 13.８ 克隆动物的安全性问题 克隆技术的伦理问题 克隆动物寿命（早衰、多病、畸形） 克隆动物食品的安全性问题 克隆动物产品最早用于生产药品 往往转基因动物都是通过克隆实现的 （1）体细胞系的建立 ；（2）Go期的诱导；（3）卵母细胞收集和去核 （4）细胞融合与激活　（5）重组胚的培养（6）胚胎移植 （7）体细胞移植后代的鉴定，确定后代是否真的来源于供体细胞系细胞。 动物体细胞克隆的路线 Cloning of endangered species 濒于灭绝的物种克隆