[畜牧兽医]2生物技术知识《蚕桑生物技术》之一B.pptVIP

山东农业大学 三、转基因育种的技术体系 重组DNA ?入植物 ? 培养再生? 选择转化体? 新品种 技术体系包括： 1 、重组DNA技术： 目的基因的制备 所用载体 A 克隆载体：E.coli 的多拷贝小质粒，保存和克隆目的基因 B 中间克隆载体：在大肠杆菌质粒中插入T-DNA片段、目的基因和标记基因，是构建中间表达载体的基础。表达载体含植物特异启动子的中间载体，是作为构建转化载体的基础。 C 卸甲载体：解除Ti、Ri致瘤，构建转化载体的受体质粒 D 转化载体：导入目的基因的载体，由卸甲载体和中间表达载体构建而成。根据其结构特点又可分为一元载体系统和双元载体系统，T-DNA与Vir基因是否在两个独立的质粒上 三、转基因育种的技术体系 2、遗传转化技术 ①重组DNA导入植物细胞或组织： 载体转化系统 直接转化系统 种质转化系统 评价转化方法的指标： A转化率；B工作效率；C适用范围；D重复性；E操作；F获得转基因植株的速度。 三、转基因育种的技术体系——2、遗传转化技术 ②转化体的筛选：培养基中施加选择压 ③转化体的鉴定 认可转基因植物的证据应包括以下几个方面 A 有严格的对照（包括阳性和阴性对照） B 外源基因整合和表达的分子生物学证据（PCR、Southern、Northern、Western杂交、ELISA） C 外源基因控制表型性状的证据 D 根