CN106929550-CN201511021352-一种以布朗葡萄藻生产生物柴油原料的方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 106929550 A (43)申请公布日 2017.07.07 (21)申请号 201511021352.6 C12R 1/89 (2006.01) (22)申请日 2015.12.30 (71)申请人 中国石油天然气股份有限公司 地址 100007 北京市东城区东直门北大街9 号中国石油大厦 (72)发明人 孙洪磊 李建忠 齐泮仑 何皓 雪晶 张家仁 孙立明 李萌萌 张佳 侯丹 (74)专利代理机构 北京律诚同业知识产权代理 有限公司 11006 代理人 梁挥 鲍俊萍 (51)Int.Cl. C12P 7/64 (2006.01) C12N 1/12 (2006.01) 权利要求书1页 说明书5页 (54)发明名称 一种以布朗葡萄藻生产生物柴油原料的方法 (57)摘要 本发明公开了一种以布朗葡萄藻生产生物 柴油原料的方法，包括以下步骤：(1) 种子培养； (2) 种子收集 ；(3) 光自养培养；(4) 微藻采收； (5) 油脂提取；本发明以布朗葡萄藻为出发菌 种，从微藻的培养条件和工艺两个方面着手，通 过引入十六烷值，不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的 比例等表征生物柴油品质的指标，来培养开始调 控藻体的含油量和高油脂品质的藻体细胞，最终 得到藻细胞的油脂含量在 30％以上，CN 值稳定 在 50 以上，不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的比例在 1.5-2.5，本发明从源头原料上有效的调节了生物 柴油的产量和品质，满足了微藻生物柴油工业化 的应用化要求，是一种较好的生产高品质微藻生 物柴油原料的方法。 A 0 5 5 9 2 9 6 0 1 N C CN 106929550 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种以布朗葡萄藻生产生物柴油原料的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： (1)将无菌布朗葡萄藻种子接种于密闭的光生物反应器中进行扩大再培养；光源为LED 灯或荧光灯，光质为白光或蓝光，光照强度为8-10Klux；种子培养基成分为：海盐24-34g/L， CH COONa 0.3-0.5g/L，NaNO 200-300mg/L，NaHPO 50-100mg/L，NaEDTA 10mg/L，FeSO · 3 3 2 4 2 4 7HO 2.5-5.0mg/L，维生素B1 0.006-0.06mg/L，维生素B2 0.00005-0.0005mg/L；培养初始 2 pH为6.0-8.0，通气强度为0.2-0.7VVM，CO 浓度为0-0.5％，培养温度为23-26℃，培养6-8 2 天，直到细胞生长到对数期； (2)对步骤(1)产出的布朗葡萄藻种子进行收集； (3)在开发式光生物反应器中对步骤(2)收集的布朗葡萄藻种子进行光自养培养；光源 为LED灯或荧光灯，光照强度为8-10Klux，光质为白光或蓝光；光自养培养基成分为：海盐 28-34g/L，NaNO 350-550mg/L，NaHPO 30-80mg/L，NaEDTA 10-30mg/L，FeSO 7HO 2.5- 3 2 4 2 4 · 2 5.0mg/L，CuSO 5HO 0.01mg/L，ZnSO 7HO 0