光学镊子-成功大学.PDFVIP

光學鑷子 【目的】 1.了解光學鑷子的運作原理。 2.用光學鑷子捕捉微粒子。 【原理】 利用光的非機械接觸特質，在不破壞物體的前提，順利達到挪動微米等級物體的效果， 即所謂光的鉗制力 ，故光學鑷子又稱光鉗（Optical Tweezers）。本實驗利用單光束的雷射光 聚焦和光子動量轉移所產生的反作用力來捕捉微粒子。 1.理論模型 （1）電磁波模型（ Electromagnetic Model ，EM Model） 適用於微粒直徑小於光波波長時，可把光看成是一電場垂直光行進方向的電磁波，此電 場會極化微粒形成 dipole ，而微粒被極化後會被電場吸引，往電場最強，也就是雷射聚焦處 被鉗住。 （2）幾何光學模型（Ray-Optics Model ，RO Model） 以幾何光學與光子動量轉移為基礎，適用在微粒直徑大於光波波長時，幾何光學理論中， 當光束由一介質進入另一介質時，行進方向會產生偏折，若把進入微粒的光束看成只有延行 進方向的動量，則光束在出微粒時，因微粒將光束部分反射與折射，使光束不再只具有進入 前單一方向的動量，同時也有其它方向的動量，由動量守恆，進入微粒光束的單一方向動量 會有一部分轉移給微粒，另一部分則在折射出微 粒的光束上，若考慮雷射在微粒中聚焦，如 光學鑷子-1 上圖所示，合力會把微粒往雷射聚焦處推近，使微粒被鉗在雷射聚焦處。 2.雷射光鉗的種類 雷射光鉗分成三種類型，分別是平放式顯微鏡，內鉗式顯微鏡及內鉗反轉顯微鏡 。平放 式顯微鏡是將物鏡平放在光學桌上（平行光學桌），雷射平行光學桌打入物鏡。內鉗式顯微鏡 則是將物鏡垂直光學桌，雷射由上往下打入物鏡，這種類型常將物鏡直接裝在顯微鏡上，是 一般實驗用顯微鏡和雷射光的結合。內鉗式反轉顯微鏡是將內鉗式顯微鏡上下顛倒，雷射由 下往上打，是醫用顯微鏡和雷射光的結合。 【儀器 】 二極體雷射 （658nm 、30mW ），反射鏡，匹配透鏡（f＝12 ㎝），分光稜鏡 ，100倍油物鏡 （N.A.＝1.30），聚光透鏡 （f ＝24.5mm 、f ＝50.0mm 、f ＝12 ㎝），鹵素桌燈（30W），三軸 1 2 3 式移動平台，濾波片，網路攝影機（Web CCD ），PC電腦、標準微粒子試劑（3μm ），物鏡油， 凡士林 ，載玻片、蓋玻片、myler pe膜 38 micrometer 。 1.二極體雷射 Power Technology 公司生產，編號LDCU5/5782 ，波長658nm ，功率30mW 。 2.匹配透鏡 匹配透鏡在雷射光鉗系統中有兩個重要的功能，一個是為了讓光束能剛好打入物鏡，以 達到最高的捕捉力，如下圖所示： 另外 一個就是增加物鏡的焦距，避免壓破樣本 ，如下圖所示 ： D d 匹配透鏡焦距可由公式： ＝ 求出， f 160 光學鑷子-2 其中D是雷射光束直徑， d是物鏡後孔徑，而 160mm則是配合物鏡決定的。若讓雷射在物鏡 後 160mm處聚焦 ，則雷射聚焦在物鏡前的距離會與物鏡的視平面相近。 3.分光稜鏡 如上圖所示，無偏極的光進入分光稜鏡，p極光會穿透，s極光則被反射，這是為了讓雷 射光能完全進入透鏡以追求最大的捕捉力，因 為雷射光有一定的偏極方向，若使偏極方向平 行 P 方向，雷射光就會完全穿透而無反射 ；如果使用的是沒有偏極性的分光稜鏡，雷射光就 一定會有一部分被反射，而減少進入物鏡的強度。另外，分光稜鏡也可把由物鏡看到的影像 傳給 CCD ，因為鹵素桌燈無偏極方向且強度夠，即使 經過反射，只剩一偏極方向的光 ，仍夠 讓我們清楚看到影像。 4.物鏡 NA值為 1.30的 100倍油物鏡，NA值的算法是 n × sin θ，n是介質折射率 ，θ是聚焦角 度，NA值愈高，捕捉力會愈強 。雷射若用愈大的角度聚焦，捕捉力會愈強，但是 ，聚焦的距 離會愈短，實驗時會很容易壓破樣品，所以 ，通常會在樣本和物鏡間滴上物鏡油（immersion oil），其折射率為