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几种常见酶的结构与功能
几种常见酶的结构与功能 蛋白酶 蛋白酶是催化肽键水解的一类酶的总称。尽管肽键的水解在能量学上是十分有利的,但如果没有蛋白酶的催化,一个肽键在中性pH和25℃条件下大概需要300年~600年的时间才能完成水解。 根据活性中心催化基团的性质,蛋白酶可以分为四类:(1)丝氨酸蛋白酶——此类蛋白酶的催化基团包括1个不可缺少的Ser残基,DIFP是它们的不可逆抑制剂;(2)金属蛋白酶——这类蛋白酶在活性中心结合金属离子,其活性绝对需要金属离子,因此金属离子的螯合剂EDTA或邻菲罗啉的存在可导致其活性的丧失;(3)天冬氨酸蛋白酶——其催化基团包括两个重要的Asp,在偏碱性的pH下无活性;(4)巯基蛋白酶——其催化基团包括1个Cys的巯基,巯基试剂为它们的不可逆抑制剂。 所有蛋白酶在催化过程中都经历四面体的过渡态,该过渡态形成的原因是反应涉及一个亲核基团进攻肽键的羰基碳。如果是丝氨酸蛋白酶和巯基蛋白酶,进攻的亲核基团分别是Ser残基的羟基和Cys残基的巯基,否则就是水分子。丝氨酸蛋白酶和巯基蛋白酶的催化机理中包括共价催化,脂酰基酶是酶与底物的共价中间物,而金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶催化的反应更为直接,没有共价催化。 丝氨酸蛋白酶 这一类蛋白酶以一个特定的Ser残基作为必需的催化基团,属于该家族成员的有胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、激肽释放酶原、凝血酶、纤溶酶和组织型纤溶酶原激活剂。 丝氨酸蛋白酶的催化机制属于共价催化和广义酸碱催化的混合体,由三个不变的氨基酸残基构成的催化三元体(Ser、His和Asp)起主导作用,这三个氨基酸残基任何一种突变或修饰(例如,Ser被DIPF修饰)均可导致酶活性的丧失。 虽然各种丝氨酸蛋白酶具有高度的同源性,但构成催化三元体的三个氨基酸残基在肽链中的位置并不完全相同。然而,酶学家已达成共识,将这三个氨基酸残基总是进行一样的编号,即His57、Asp102和Ser195。它们在催化中的具体功能是:(1)Ser195充当进攻底物的亲核基团;(2)His57作为广义的酸碱催化剂;(3)Asp102 的功能仅仅是定向His57,影响His的 pKa,改变其酸碱性质。 胰蛋白酶具有很深的底物结合口袋,而口袋的底部又是Asp,特别适合长的碱性氨基酸侧链(Lys和Arg)的结合;糜蛋白酶的底物结合口袋没有胰蛋白酶深,但比它宽,而且口袋壁分布的是疏水氨基酸,所以特别适合芳香族氨基酸的结合;弹性蛋白酶的底物结合口袋非常浅,最适合结合侧链较小的氨基酸残基。 丝氨酸蛋白酶的催化三元体 糜蛋白酶催化的四 面体中间物的形成 糜蛋白酶催化形成的 四面体中间物的稳定
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