1熟悉高效液相色谱仪的基本结构和操作方法.pptVIP

* * 1．熟悉高效液相色谱仪的基本结构和操作方法。 2．熟悉高效液相色谱的定量方法（内标法）。 实验二十三 HPLC法测定咖啡因的含量 实验目的 用十八烷基化学键合相作固定相，甲醇/水或乙醇/水作流动相，可使咖啡因与非那西丁完全分离，而且保留值相近。因此，以非那西丁作内标可进行咖啡因的定量测定。 在样品中加入内标物质ms进样，样品中被测组分峰面积和内标峰面积为分别Ai和As，则样品中被测组分的百分含量为： Pi%= Ai ms fi,s Asm ×100% 式中fi,s为被测组分对于内标物质的相对校正因子，可在 标准品 mi中加入内标物质ms进样，得标准品 峰面积Ai和内标峰面积As，然后按下式求得： fi,s= miAs msAi 对于正常峰,也可用峰高定量。 实验原理 仪器与试剂 液相色谱仪（岛津2010），50uL微量注射器，ODS C18柱，重蒸水，色谱甲醇，氯仿，咖啡因样品（原料药），咖啡因标准品，非那西丁标准品。