一水势的测定-生物学教学中心.pdfVIP

实验一 水势的测定 实验一 水势的测定 实实验验一一 水水势势的的测测定定(压力室法) 在植物生理学上，水势定义为单位偏摩尔体积水的化学势，是植物水分状 况的基本度量，体现了植物体内水分的能量状态。由于纯水的水势为零，所以 植物水势一般为负值。常用压力室法和热电偶湿度计法测定水势。下面主要介 绍压力室法： 一、原理 一、原理 一一、、原原理理 植物叶片由于蒸腾作用不断地向四周环境散失水分，而使叶片本身水势降 低，并由此造成土壤→植物→大气和植物体中根→茎→叶的水势下降梯度。由 于叶子低下的水势所引起的拉力，使植物木质部水链系统的水分常处于一定的 张力之下。当切下叶片时，叶片木质部张力解除，导管中汁液缩回木质部(水 势愈低，缩回愈多)。将切下的叶片放在加压室中，加压使木质部汁液正好推 回切口处，此时的加压值等于切取叶片之前木质部张力的数值，即加压值(平 衡压)大致等于叶片水势值。 二、仪器设备 二、仪器设备 二二、、仪仪器器设设备备 压力室，多用美、日进口压力室(国内兰州大学生物系已研制成功)。 三、操作方法 三、操作方法 三三、、操操作作方方法法 1. 取样：从植株上切取叶片或一段带叶的小枝，迅速用湿纱布包裹或装入 塑料袋中以防止水分逸失，然后进行装测。测定玉米之类长大叶片的水势，应 选取叶子贴近主脉两侧的下端部分。 2. 装样：将样品迅速插入橡皮室孔隙中，使切口露出密封垫圈几毫米，固 定后放入钢筒中，旋紧螺旋环套。为避免样品失水，可预先用湿滤纸条贴于钢 筒内壁。 3. 加压测定：将压力控制阀转向“加压”位，打开主控阀，以每秒0.5 巴 左右的速度加压，接近叶水势时，加压要慢些，以免加压过量。当切口出现水 膜时，马上关闭主控阀，读出加压值(叶水势值)。可按下式换算成需要的单位： 1 巴(bar)=0．987 大气压=0．1 兆帕(MPa)。 4. 排气：将压力控制阀转向“排气”位，放气，压力表指针退回至零，扭 动螺旋环套，取出叶片，进行第二个样品测定，一般重复4 次，取平均值。 1 四、注意事项 四、注意事项 四四、、注注意意事事项项 1. 加压所用气体为氮气，如用含C0 太多的气体，对细胞有伤害。 2 2 . 钢瓶的搬运和使用要遵守钢瓶使用规定。 3. 要注意控制加压速度，否则会影响钢筒中的温度，并进而影响测定精度。 4. 用做压力室的钢筒一般为不锈钢，其厚度为5.0～10mm，依所需加压 力确定。 2 实验二 植物材料中可溶性糖的测定 实验二 植物材料中可溶性糖的测定 实实验验二二 植植物物材材料料中中可可溶溶性性糖糖的的测测定定 一 、原理 一 、原理 一一 、、原原理理 碳水化合物是所有植物以及菌类的主要成分。某些植物组织中碳水化合 物的含量可高达干重的80％～90％以上。碳水化合物的种类也极为广泛，有 各种储藏性多糖如淀粉、果聚糖、粘胶质，多元醇及糖苷等，也有各种寡糖 及游离的单糖如葡萄糖、果糖等。各种碳水化合物的性质不同，测定的方法 也各异。这里介绍主要的几种可溶性糖即葡萄糖、果糖、蔗糖及可溶性总糖 的测定方法。 二、仪器设备 二、仪器设备 二二、、仪仪器器设设备备 恒温水浴、分光光度计和烘箱等。 三、操作方法 三、操作方法 三三、、操操作作方方法法 l. 酒精提取可溶性糖：各种植物叶片或种子在110℃的烘箱内鼓风固定 15min，然后调温至70℃过夜。干叶片磨碎后称取50mg样品倒人l0ml刻度 离心管内加入4ml 80％酒精，置于80℃水浴不断搅拌40min，离心,收集 上清液，其残渣加80％酒精重复提2次，合并上清液。在上清液中加l0mg 。 活性炭，80 C脱色30min，定容