肽链末端分析末端氨基酸的测定-基础化学教学示范中心.ppt

第四章 蛋白质化学 学习目的：认识生物大分子蛋白质的化学结构和特性。 本章要求：掌握氨基酸的特点、结构和三字符号；掌握肽键和多肽的概念以及结构特点；掌握蛋白质的性质、分离纯化的方法； 掌握蛋白质的一级结构概念和二级结构的概念以及二级结构的类型。 第一节 概述 一、蛋白质的概念 由许多不同的α-氨基酸按一定的序列通过酰胺键（肽键）缩合而成的，具有较稳定的构象并具有一定生物功能的大分子。 1. 蛋白质是生命的物质基础 凡是有生命的地方，基本上都有蛋白质起作用。 蛋白质是细胞内含量最高的组分，占许多生物体干重的45~50%以上。 2. 蛋白质是含氮元素恒定的生命物质。 各种蛋白质中N元素的含量平均为16%。 二、蛋白质的分类 1. 分类依据——蛋白质不能按化学结构分类 常用依据：生物来源、理化性质、分子形状、化学组成等。 2. 三种分类方法——按组成分类常用 1）根据分子形状：球状和纤维状蛋白； 球状蛋白：轴比小于10，较易溶解。 常见：血红蛋白，血清球蛋白，豆类球蛋白等。 纤维状蛋白：轴比大于10，不溶于水。 常见：羽毛中的角蛋白和蚕丝中的丝蛋白等。 二、蛋白质的分类 2)根据溶解度： 清蛋白：白蛋白，溶于水； 精蛋白：溶于水和酸性溶液，含碱性氨基酸多 组蛋白：溶于水及稀酸，含碱性氨基酸较多 球蛋白：微溶于水而溶于稀中性盐溶液 谷蛋白：不溶于水、醇及中性盐溶液，溶于稀酸、稀碱，如麦蛋白。 醇溶蛋白：不溶于水，溶于70~80%乙醇； 硬蛋白：不溶于水、盐、稀酸、稀碱。 二、蛋白质的分类 3)根据组成： 单纯蛋白质：仅由氨基酸组成。如清蛋白、球蛋白、组蛋白等。 结合蛋白质：氨基酸、糖、脂肪、核酸、磷酸以及色素等。 核蛋白 色蛋白 糖蛋白：几乎存在所有组织； 脂蛋白：血浆脂蛋白、膜脂蛋白等。 磷蛋白：酪蛋白、卵黄蛋白等。 三、蛋白质的生物学功能 催化功能：酶； 调节功能：激素、受体、毒蛋白等； 结构功能：构成细胞和组织； 运输功能：血红蛋白，载脂蛋白等； 免疫功能：抗体； 运动功能：肌肉，纤毛和鞭毛； 储藏功能：乳汁中的酪蛋白等； 生物膜的功能：通透性、信号传递、生理识别等。 第二节 蛋白质的基本单位——氨基酸 一、蛋白质的水解 1. 酸水解 常以5~10倍的20%HCl煮沸回流16~24h，或加压于120℃水解12h。 优点：水解彻底，产物为L-氨基酸； 缺点：色氨酸破坏，水解液呈黑色。 应用：氨基酸工业生产、蛋白质分析等。 第二节 蛋白质的基本单位——氨基酸 2. 碱水解 6mol/L NaOH或4 mol/L Ba(OH)2煮沸6h。 优点：色氨酸未破坏，水解液清亮； 缺点：氨基酸发生旋光异构。 一般很少使用。 3. 酶水解 条件温和，常温（36~60℃）、常压和pH2~8，氨基酸未破坏，不发生旋光异构；但水解不彻底。 二、氨基酸的结构特征 1. 结构特征——氨基酸是氨基取代羧酸 氨基酸的结构通式： 19种氨基酸具有一级氨基（-NH2）和羧基（-COOH）结合到α碳原子（Cα），同时结合到（Cα）上的是H原子和各种侧链（R）； Pro具有二级氨基（α-亚氨基酸）。 二、氨基酸的结构特征 2. 常见氨基酸——20种基本氨基酸 从细菌到人类，所有蛋白质都由20种基本氨基酸（20 standard amino acids)组成。 三、氨基酸的分类 （1）根据酸碱性质： 酸性氨基酸：谷氨酸和天冬氨酸； 碱性氨基酸：精氨酸、赖氨酸和组氨酸； 中性氨基酸：15种，包括两种酰胺。 三、氨基酸的分类 （2）根据R的化学结构 脂肪族氨基酸：15种。 芳香族氨基酸：Phe、Tyr 、Trp 杂环氨基酸：His 杂环亚氨基酸：Pro 三、氨基酸的分类 （3）根据R的极性 ①极性氨基酸： a）不带电：Ser、Thr、 Tyr（OH）、 Asn、Gln（CONH2）、Cys（SH）； b）带正电：His、Lys、Arg； c）带负电：Asp、Glu ②非极性氨基酸：Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Met、Trp 、Pro 四、氨基酸的性质 1. 一般物理性质 无色晶体，熔点较高（200℃以上），能溶于水、稀酸或稀碱中，不溶于有机溶剂； 除Gly外都有旋光性。 2. 两性解离和等电点 氨基酸在水溶液中或在晶体状态时都以离子形式存在，在同一个氨基酸分子上带有能放出质子的—NH3+正离子和能接受质子的—COO-负离子，为两性电解质。 调节氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的—+NH3基和—COO-基的解离程度完全相等时，即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（pI）。 生理pH值时，大多数氨基酸以两性离子存在。 等电点时，Glu主