支原体属和脲原体属一方案介绍.pptVIP

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精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改。 /jnejclxh /see161 / / / 支原体属和脲原体属 支原体是性传播疾病的病原体之一。 支原体(Mycoplasma) 1.能在人工培养基中生长 2.能独立生活 3.最小原核细胞型微生物 4.无细胞壁 5.二分裂繁殖 6.多形态性,“油煎蛋样”菌落 分 类 柔膜体纲(Mollicutes) 支原体目(MycoPlasmatales) 下分3个科: ① 支原体科(MycoPlasmataceae); 2个属: 支原体(Mycoplasma) 脲原体(Ureaplasma) ② 无胆甾原体科(Acholeplasma-taceae) 生长时不需要外源性胆固醇; ③ 螺原体科(Spiroplasmataceae) 生长至一定阶段呈螺形。 生长繁殖 繁殖方式: 二分裂方式 球体延伸、分节断裂、出芽、分枝 繁殖周期:3小时 营养要求:较高,含动物血清、酵母浸液 酸 碱 度:pH7.8~8.0 气体环境:5%CO2或5%CO2与95%N2 温度与时间:37℃,3d~10d 菌落特征: “油煎蛋”状菌落 抗原构造 主要抗原成分: 1.蛋白质 P1蛋白抗原:表面抗原 致病:粘附 2.脂质中的糖脂 抗体:产生补体结合抗体 生长抑制抗体 代谢抑制抗体 抵抗力 理化因素:比细菌敏感(因无细胞壁) 热:弱, 50℃经30min死亡 -20℃可长期保存 耐碱 酸和有机溶剂:较敏感(消毒剂、清洁剂) 四环素族、红霉素、卡那霉素、氯霉素: 敏感 青霉素:不敏感 致病性 外源性感染 上呼吸道感染:感冒、咽炎、气管炎 支原体性肺炎 (Mycoplasmal pneumonia) (原发性非典型肺炎) (primary atypical pneumonia) 临床表现和胸部X线: 肺炎链球菌引起的典型肺炎不同 类似病毒性肺炎 免疫性 抗体:多种(CF抗体、生长抑制抗体、 杀支原体抗体等) 呼吸道sIgA:有一定作用 非特异冷凝集素: 1.和自身免疫有关 2.患者阳性率为50%, 常用于辅助诊断。 微生物学检查法 病原分离 特异核酸的检测 血清学诊断 抗原检测 冷凝集试验 病原分离 标 本:咽拭子或痰液 培养基:双相培养基(含马血清、酵母浸液) SP-4培养基(提高分离率30%~40%) 气体环境:5%~10%CO2 温度与时间:37℃,l~2W 可疑菌落: 1.糖发酵 2.溶血性 3.血细胞吸附 4.特异抗血清生长抑制试验等 特异核酸的检测 (1)聚合酶链反应(PCR): 优点:特异性好 敏感性高 快速、简便 靶基因:16S RNA基因 P1蛋白基因 方法:套式PCR(nPCR) 复合PCR 限制性片段长度多态性分析(RFLP) 随机引物PCR(RAPD) (2)基因探针 根据碱基严格互补配对的特性 特异性强,敏感性不如PCR技术 血清学诊断 (1)补体结合试验(CFT): 双份抗体效价升高4倍以上?诊断 (2)间接血凝试验(IHA): 测抗体, 2—3周高峰 (3)酶联免疫吸附试验(ELISA): 测IgM、IgG和IgA 敏感性高 (4)间接免疫荧光试验: 检测IgM、IgG 特异性较强 抗原检测 方法1:间接法或直接法 抗体:荧光标记多克隆抗体或单克隆抗体 检测标本:呼吸道分泌物中抗原 86%可阳性 方法2:双抗体夹心酶联免疫吸附试验 检测标本:呼吸道分泌物中抗原 可检出105 CFU /ml 方法3:酶联免疫吸附试验捕获法 抗体:抗P1单克隆抗体 检测标本:P1蛋白 可检出104CFU/ml 特异性强,3小时即可

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