专题2.3 分解纤维素的微生物的分离（课件）-2017-2018学年高二生物同步精品课堂（基础版）（选修1）.ppt

分解纤维素的微生物的分离 选修1专题2课题3 1．纤维素 含________三种元素，是一种多糖。纤维素的基本组成单位是________，人体内没有________，所以人体不能直接以纤维素为能源物质，但土壤中有分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成________释放到无机环境。 栏目链接 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 　 　 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 C、H、O　 葡萄糖 纤维素酶 葡萄糖 2.纤维素酶 纤维素 C1酶 Cx酶 纤维二糖 葡萄糖苷酶 葡萄糖 （二）纤维素分解菌的筛选 1.方法： 刚果红染色法 通过________反应直接筛选。 颜色 刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通过______________来筛选纤维素分解菌。 2.原理 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 四种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈 【典型例题】 在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是(　　) A. 用液体培养基可获得大量菌体 B. 纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长 C. 用液体培养基可以充分利用培养基中的营养物质 D. 用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌 A 刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的 有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是 (填图中序号)。 【变式训练】 量与活性 ① 有透明降解菌说明纤维素被纤维素酶催化降解，则降解圈大小与纤维素酶的量与活性有关。降解圈越大，说明降解纤维素能力最强。 【方法点拨】 二、实验设计 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 尿素分解菌的分离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上； 本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴别培养基上。其它操作基本相同。 具体操作： 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1.制备鉴别培养基: 鉴别纤维素分解菌的培养基 CMC-Na 5-10g 酵母膏 1g KH2PO4 0.25g 琼脂 15g 土豆汁 100ml 将上述物质溶解后,用 蒸馏水定容到1000ml 2.涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上，30℃倒置培养。 挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 透明圈 无透明圈 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30℃－37℃培养，可获得纯培养。 【典型例题】 以下关于分离纤维素分解菌的实验操作错误的是（ ） A. 经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B. 选择培养这一步可省略，但得到的纤维素分解菌会较少 C. 可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量 D. 对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素的培养基上 A 【变式训练】 下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是(　　) ①土壤取样 ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1 mL进行平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度 A.①→②→③→④ B.①→③→②→④ C.①→②→④→③ D.①→④→②→③ C 点拨：在分离土壤中某细菌时，应先选取土样(10 g)，然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数。 分解纤维素的微生物的分离 纤维素酶 种类、作用、催化活力 刚果红染色 筛选原理 实验设计 土壤取样 选择培养 涂布培养 纯化培养 前置染色法 后置染色法 富含纤维素土壤 增大分解菌含量 染色鉴别 分离出分解菌 【课堂小结】 * *