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样本采集和实验室分析-2014教学讲义.ppt
三、实验室检验 检什么 毒素检测 病原分离 细菌 病毒 寄生虫 血清学检查 抗原 抗体 急性期IgM抗体 急性期和恢复期双份静脉血测定特异性IgG抗体。 核酸检测 特征基因、毒力基因、溯源比较 定性/定量 怎么检 用什么方法(同时需要考虑方法灵敏度、准确度、重现性、不同方法结果的可比较性、还需要考虑待测样品(毒物、代谢物)、分析要求(定性、定量)、样品类型、实验室条件,分析目的等因素,还要考虑时效性、准确性、经济性等要求) 用什么试剂 对重大事件的毒物鉴定或样本检测要同时送数家具有鉴定检验资质的实验室同步开展工作,避免因实验室管理和技术因素对结果的影响。 采样时,分装N份,分别保存和送检 怎么检 快速灵敏方法的应用 仪器自动化方法 改进分离培养方法 怎么检 检验流程: 1 . 样品采集 ↓ 2. 初步检验→(直接镜检、免疫快诊、PCR。。。) ↓ 3. 分离培养 (包括增菌培养和直接平板培养) ↓ 4. 初筛试验、纯培养(快速诊断方法的使用) ↓ 5. 全面鉴定(菌株鉴定、毒素测定)(快速检测方法) 四、结果的报告与分析 结果的报告与分析 检验结果的正确性不仅取决于实验室的条件和技术水平,同时还与检验样品的采集、保存、送样方法等方面有关。因此在分析检验结果时,除了应考虑结果是否符合有关实验室判定标准外,还应综合考虑各种影响检验结果的因素。 结果的报告与分析 阳性结果不一定能说明病原因子在爆发事件中的致病作用;反之阴性结果也不一定能完全否定某种病原因子的病因假设. 结果的报告与分析 实验室检测结果是确定病因的重要依据,但实验室结果要和现场调查情况、患者的临床表现一起分析,才能确定病因。 五、案例分析 2010年9月8日起,四川某高职学院陆续有学生发病,症状以腹痛、腹泻为主,部分学生伴恶心、呕吐,个别有发热等症状并到本校医院进行治疗,疾病预防控制中心疫情处理人员于9月15日接到报告后赶赴现场调查和采样。 问题1:现场调查内容? 微生物食物中毒标本采集 实验室检测及结果分析 概述 一、标本采集 二、检测项目确定 三、实验室检验 四、结果解读报告与分析 五、案例分析 准确的检测结果包括 正确采集样品 正确选择检测方法 多种检测方法运用 综合分析判断 细菌性食品中毒的主要特征及主要检验标本 流行病学——实验室 样本采集方案与检测人员沟通,便于实验室分析处理。样本前期处理,做好实验前准备。 共同商定分析方案:现场工作人员或临床医务工作者要和实验室分析人员多沟通,对现场情况、所收集样本的情况、现场工作的方向等进行讨论,确定应该检验的毒物种类以及是否需要定量,据此制定实验室检测工作方案。 一、标本采集 (1)及时性原则 (2)针对性原则 (3)适量性原则 (4)不污染原则 规范采样是获得可靠检测结果的重要保证 合理的采样时机和种类 足够的样品采样量 多种样品同时采集 正确的采样方法 样品妥善保存运输 杯状病毒(诺如病毒、扎如病毒)排病毒数量与病程有关,发病4天内几乎100%病人排病毒,易于检查; 病程5~9天时50%排病毒;病程10天后约10%排病毒。 采样时机对检验结果的影响 注意:样品标签和登记信息,帮助实验室选择最佳样品检测,帮助实验室结果的解释 正确采样方法 无菌操作 防止采集的标本受到影响 多种样品同时采集 (一) 食品 (二)水源 (三) 临床标本 粪便、血液、呕吐物、手表面、尸体标本 (四)物体表面: 刚被稀便污染的尿布、衣服、 床单等,炊事用具,其它可能被污染的物体表面 (五) 宿主动物 (六) 昆虫等媒介生物 (一)食品标本的采集方法 用灭菌工具采取可疑食物,以及原配料、半成品等,置于灭菌容器中。 如已无可疑食物,可用灭菌棉拭在可疑食物的容器内涂抹,置于装有少量生理盐水的试管内。 可疑的食物盒子可直接送检,如仅剩空盒,可将空盒送检。 (二)水源标本的采集方法及注意事项 以灭菌的500ml盐水瓶采取水样至少450ml,但不能让水样充满整个瓶子,应留有一定的空气
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