2018版 选修3 第1讲 基因工程.doc

选修　现代生物科技专题第1讲　基因工程 考纲要求 全国卷五年考情 1.基因工程的诞生(Ⅰ) 2017·卷ⅠT38 2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ) 2017·卷ⅠT38,2017·卷ⅡT38,2017·卷ⅢT38,2016·卷ⅢT402016·卷ⅠT40,2015·卷ⅠT40,2015·卷ⅡT40,2014·卷ⅡT40 2013·卷ⅠT40 3.基因工程的应用(Ⅱ) 2017·卷ⅠT38,2017·卷ⅡT38,2014·卷ⅡT40 4.蛋白质工程(Ⅰ) 2015·卷ⅡT40,2013·卷ⅠT40 考点一| 基因工程的基本工具 (对应学生用书第245页) [识记—基础梳理] 1．基因工程的概念及优点 (1)概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 (2)优点 ①与杂交育种相比：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 ②与诱变育种相比：定向改造生物的遗传性状。 2．基因工程的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(简称：限制酶) ①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ②作用：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并切开特定两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 ③结果：产生黏性末端或平末端。 已知限制酶EcoR Ⅰ和Sma Ⅰ识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓AATTC和CCC↓GGG，在下图中写出这两种限制酶切割DNA后产生的末端种类。 (2)DNA连接酶 (3)载体 ①常用载体：质粒，其化学本质是独立于拟核之外的双链环状DNA分子。 ②其他载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 ③特点及意义： 特　点 意　义 稳定并能复制 目的基因稳定存在且数量可扩大 有一至多个限制酶切割位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择 [教材边角知识]　选修3　P6“寻根问底”,DNA连接酶和DNA聚合酶的作用相同吗？试简要说明。_________________________________________________________________ 【提示】　不相同。DNA连接酶连接的是两个DNA片段，而DNA聚合酶连接的是单个的脱氧核苷酸。 [理解—深化探究] 1．基因工程技术使用限制酶需注意哪些问题？ 【提示】　①获取目的基因和切割载体时，经常使用同一种限制酶(也可使用能切出相同末端的不同限制酶)，目的是产生相同的黏性末端或平末端。②获取一个目的基因需限制酶切割两次，共产生4个黏性末端或平末端。③限制酶切割位点的选择，必须保证标记基因的完整性，以便于检测。④为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒。 2．限制酶和DNA连接酶的关系 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。 (2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 (3)DNA连接酶起作用时，不需要模板。 [运用—考向对练] 考向　考查基因工程的基本工具的作用 如图所示为pBR322质粒，其中ampr(氨苄青霉素抗性基因)和tetr(四环素抗性基因)为标记基因，ori为复制原点，其他均为限制酶及其识别位点，并且每种限制酶都只有一个。pBR322质粒是基因工程较常用的运载体。回答下列相关问题： (1)制备重组质粒，需要限制酶和_____酶。如制备重组质粒时，使用Pvu Ⅰ切割该质粒，则检测目的基因是否导入受体细胞，需要在培养基中添加_______。 (2)该质粒中的BamHⅠ识别的核苷酸序列及切割位点为，而Sau3A Ⅰ识别的核苷酸序列只有4个碱基。若BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ分别切割DNA所形成的DNA片段能拼接成一条DNA链，则Sau3A Ⅰ识别的核苷酸序列及切割位点为________。该拼接在一起的DNA片段，能否被BamH Ⅰ识别？________。 (3)与图示质粒相比，完整的重组质粒中还应有________________________等三种特殊的DNA片段。将重组质粒导入动、植物细胞的方法分别为________，如受体细胞为大肠杆菌，则该菌经钙离子处理后，将具备________________的特性。 [解析]　(1)基因工程所用的工具酶是限制酶和DNA连接酶。使用Pvu Ⅰ切割pBR322质粒会破坏ampr(氨苄青霉素抗性基因)，而tetr(四环素抗性基因)，不受破坏所以可用含有四环素的培养基来筛选具有目的基因的细胞。 (2)综合设问信息，可推知Sau3A Ⅰ识别的核苷酸序列及其切割位点为，这样Sau3A Ⅰ和BamH Ⅰ切割DNA时才能形成相同的黏性末端，进而能被拼接成一条DNA链。重新拼接点的核苷酸