培养基课件方案研究.ppt

第四章 微生物培养基;目录;一、培养基概说（media）;广义的培养基：一切可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料。 主要用途：繁殖及分离接种微生物，传代或保存微生物，鉴别微生物的类属，研究微生物的生理及生化特性，制造菌苗、疫苗或其他微生物制剂等。 营养成分：包括微生物生长所需要的水分、碳源、氮源、无机盐及某些生长因子（维生素、辅酶）等。;巴斯德最初用的培养基是有机物水浸液、含糖培养基 科赫发明的固体培养基—土豆、明胶以及琼脂； 从玻璃板到培养皿； 世界闻名的生产培养基的专业公司—Difco和Oxid 我国培养基生产单位已有50多个，主要生产干燥培养基，方法有喷雾干燥法、冷冻干燥法、真空干燥法； 干燥培养基的优点在于使用方便、节省人力， 易运输，好保存，质量可靠，便于管理。;三、选用和设计培养基的原则; ;营养的要求主要是对碳素和氮素的性质 碳源：自养型的微生物则主要考虑无机碳源 异养型的微生物，主要提供有机碳源； 除碳源物质外，还要考虑加入适量的无机矿物质元素 有些微生物菌种在培养时还要求加入一定的生长因子。 除营养物质要求外，还要考虑营养成分的比例适当，其中碳素营养与氮素营养的比例很重要。 C/N ： 指培养基中所含 C 原子的摩尔浓度与 N 原子的摩尔浓度之比，不同的微生物菌种要求不同的 C/N 比。 例：谷氨酸的发酵生产： 当C/N=4时，菌体大量繁殖，Glu积累少； 当C/N=3时，菌体繁殖受抑，Glu大量积累。;3.物理化学条件适宜;4.经济节约;1.生态模拟 肉汤、鱼汤培养细菌 水果汁培养酵母菌 米饭、面包培养霉菌 肥土培养放线菌 2.查阅文献 3.精心设计 4.试验比较 由定性到定量； 由小到大 摇瓶培养?台式发酵罐?生产发酵罐;（一）根据成分划分 1．天然培养基(complex medium; undefined medium) 是利用一些天然的动植物组织器官和抽提物，如牛肉膏、蛋白胨、麸皮、马铃薯、玉米浆等制成。它们的优点是取材广泛，营养全面而丰富，制备方便，价格低廉，适宜于大规模培养微生物之用。缺点是成分复杂，每批成分不稳定。我们实验室常用的牛肉膏蛋白胨培养基便是这种类型。 2．合成培养基(defined medium; synthetic medium) 是利用已知成分和数量的化学物质配制而成。此类培养基成分精确，重复性强，一般用于实验室进行营养代谢、分类鉴定和选育菌种等工作。缺点是配制较复杂，微生物在此类培养基上生长缓慢，加上价格较贵，不宜用于大规模生产。如实验室常用的高氏1号培养基，察氏培养基。 3．半合成培养基(semi-defined medium) 用一部分天然物质作为碳氮源及生长辅助物质，又适当补充少量无机盐类，这样配制的培养基叫半合成培养基。如实验室常用的马铃薯蔗糖培养基。半合成培养基应用最广，能使绝大多数微生物良好地生长。;（二）按照培养基外观的物理状态;琼脂和明胶若干特性的比较;总结 固体培养基 可逆性凝固培养基：1%-2%的琼脂或5%-12%的明胶 非可逆性凝固培养基：血清和无机硅胶制成的培养基 天然固体培养基：天然固体基质配制成的培养基 滤膜：醋酸纤维薄膜 半固体培养基：0.5%左右的琼脂； 脱水培养基：成分精确和使用方便的现代化培养基 液体培养基：大量生产和增菌培养; 1.基础培养基（Basic media） 2.选择性培养基（Selected media） 3.鉴别性培养基（Differential media）;1.基础培养基;2.选择培养基;3.鉴别性培养基;一 些 鉴 别 培 养 基; 蛋白胨 10g 　 乳 糖 5g　 　 蔗 糖 5g 　　 K2HPO4 2g 伊红 0.4g　 美 蓝 0.065g 　 蒸馏水 1000ml pH=7.2;伊红系酸性染料 美蓝为碱性染料;Klebsiella（克雷伯氏菌属）;（四）按照培养基具体类型分类;（2）种子培养基 供孢子发芽、生长、繁殖，菌丝体生长 要求： 营养丰富完全 氮源丰富 维生素 高溶氧量 稳定的pH 最后一级种子培养基通常成分接近于发酵培养基;（3）发酵培养基 菌体生长、繁殖、合成产物 要求： 必需元素和化合物 合成产物所需元素、前提和促进剂 根据条件可采用分批补料工艺;二、发酵培养基的成分及来源;一、碳源;糖;油;有机;烃;1、氮源的功能;2、氮源的种类;1、无机氮源;氨水： 在发酵中除可以调节pH外，它也是一种容易被利用的氮源，在许多抗生素的生产中得到普遍使用。 氨水因碱性较强，因此使用时要防止局部过碱，加强搅拌，并少量多次地加入。 另外在氨水中还含有多种嗜碱性微生物，