logo

您所在位置网站首页 > 海量文档  > 报告/分析 > 农林牧渔

低能离子束介导水稻遗传转化的研究.pdf 8页

本文档一共被下载: ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。

  • 支付并下载
  • 收藏该文档
  • 百度一下本文档
  • 修改文档简介
全屏预览

下载提示

1.本站不保证该用户上传的文档完整性,不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。
2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。
3.登录后可充值,立即自动返金币,充值渠道很便利
( ) 核 农 学 报  2001 ,15 4 :199~206 199   Acta Agriculturae N ucleatae Sinica ( ) 文章编号 2001 低能离子束介导水稻遗传转化的研究 李  红  吴丽芳  余增亮 ( 中国科学院等离子体物理研究所 离子束生物工程实验室  安徽 合肥  230031) 摘  要 :为研究影响低能离子束介导水稻遗传转化效率的各种因素 , 以粳稻 02428 、花 培 94鉴09 、籼稻明恢 63 这 3 个水稻品种为实验材料 ,分析了离子的种类 、能量 、剂 量 、剂量率等参数对遗传转化的影响 ,建立了有利于遗传转化的组织培养条件和筛选 程序 。分子生物学检测证明 ,外源 GUS 报告基因已经整合到水稻基因组中 ,3 个水稻 品种获得抗性愈伤组织的转化率分别为 11 % 、114 %和 71 % ,获得再生试管苗的转 化率分别为 152 % 、187 %和 113 % 。为应用离子束介导法进行其它对农杆菌不敏 感的禾谷类作物转基因提供了方法学的参照 ,并为深入研究离子束与生物体相互作 用机制打下了基础 。 关键词 :低能离子束 ;水稻 ;遗传转化 1991 年中国科学院等离子体物理研究所余增亮研究员首次提出低能离子束处理植物细 胞能协助外源 DNA 导入细胞的设想 ,这一设想已得到不同实验小组研究成果的证实[ 1~5 ] 。为 了进一步探讨影响转化率的各种因素 ,建立一个稳定高效的水稻成熟胚转化系统 ,本研究选用 粳稻 02428 、花培 94鉴09 、籼稻明恢 63 这 3 个水稻品种 ,详细比较了离子种类能量 、剂量 、脉冲 剂量等对种胚出愈率的影响 ,对转化参数进行了分析和优化 ,得到了转基因试管苗 。 1  材料与方法 11  水稻品种 转基因受体材料为广亲和粳稻 02428 、花培 94鉴09 和籼稻明恢 63 ,其中花培 94鉴09 由 上海农业科学院陈若雷惠赠 ,其它品种由安徽省农业科学院水稻所惠赠 。 12  质粒及菌株 质粒 pCAMBIA1301 在大肠杆菌 E . Coli DH5α(基因型 sup E44 hsdR17 recA endAlgyrA 96thi ) ( ) ( ) 1relA1 中扩增 ;pCAMBIA1301 含有潮霉素 hygromycin 抗性基因 HYG R 和 GUS 报告基因 ,其 中 GUS 基因编码区有一内含子 ,使 GUS 基因只能在植物中表达而不会在细菌中表达[5 ] 。 收稿 日期 ( ) ( ) 基金项 目:本研究课题得到自然科学基金 重大项 目资助和国家重点科技攻关项 目 965380201 资助 ( ) 作者简介 :李  红 1972~ ,女 ,安徽桐城人 , 中国科学院等离子体物理研究所核能科学与工程专业博士 ,从事低能离子 束介导植物遗传转化研究 200 核  农  学  报 15 卷 13  酶与试剂 DNA 限制性内切酶 、DNA 分子量参照物为 Promega 公司产品;凝胶中DNA 片段回收与纯 化试剂盒为 Qiagene 公司产品 ,Taq DNA 聚合酶为上海 Sangon 产品 ,地高辛 DNA 高效标记及杂 交检测试剂盒为Boehringer 公司产品 ,XG1uc 、潮霉素 Hygromycin B 为 Sigma 公司产品 ,其它均

发表评论

请自觉遵守互联网相关的政策法规,严禁发布色情、暴力、反动的言论。
用户名: 验证码: 点击我更换图片

“原创力文档”前称为“文档投稿赚钱网”,本站为“文档C2C交易模式”,即用户上传的文档直接卖给(下载)用户,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的收益归上传人(含作者)所有【成交的100%(原创)】。原创力文档是网络服务平台方,若您的权利被侵害,侵权客服QQ:3005833200 电话:19940600175 欢迎举报,上传者QQ群:784321556