一、遗传密码的破译.PDF

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一、遗传密码的破译 (1)1954年Gamow首先对遗传密码进行了探讨; (2 )1961年Crick 和Brenner证明三联体密码子是正确的; (3 )1961年,Nirenberg和Matthaei 以均聚物、随机共聚物、 特定序列的共聚物作模板合成多肽,破译遗传密码; (4 )1964年,Nirenberg 用核糖体结合技术研究遗传密码, 直接测出三联体对应的氨基酸; (5 )到1966年,遗传密码全部破译。 Matthaei Nirenberg 1955 Ochoa 从细菌中分离出的多核苷酸磷酸化酶 ♪ 催化合成RNA而不需要模板DNA或RNA ♪ 合成各异的多聚核苷酸 poly(A)、poly(U)……… (依据所加核苷二磷酸的比例不同) 实验依据 蛋白质体外合成的实验基础 E. coli 的无细胞体系(DNA、mRNA、tRNA、核糖体、 AA—tRNA合成酶) 破坏掉DNA、耗尽mRNA后 加入模板(外源mRNA或人工合成的多聚NT )加入 ATP 、GTP、AA等成分合成新的肽链 推知编码某些AA 的密码(比较………) 加入除去了DNA和 mRNA 的细胞提取物 肽链 以多聚物为模板指导多肽的合成 1961 Nirenberg 和Matthaei poly UUUU编码Phe poly C Pro poly A Lys 于是作如下实验 人工合成多种三核苷酸(UUU、UCU、UGU等) 为模板 与含核糖体、20种aa-tRNA和适当离子强度的 反应液保温 使反应液通过硝酸纤维素滤膜,其中只有核糖 体或结合aa—tRNA 的核糖体能留在滤膜上 实验为20组: SerC14 、Leu、Lys、Arg…………. (20种) Ser 、LeuC14 、Lys、Arg…………. Ser 、Leu、LysC14 、Arg…………. …………………… 分析留在滤膜上的核糖体中的aa-tRNA和其相应的模 板 此方法未能破译全部的codon (结合效率) 核糖体结合技术 特定三核苷酸为模板+ 核糖体+ 20 种AA-tRNA 14 (其中一种AA-tRNA的氨基酸被 C标记) 保温 硝酸纤维滤膜过滤 分析留在滤膜上的核糖体-AA-tRNA 确定与核糖体结合的AA和模板 Ser-C14 …. Leu-C14 …. Lys-C14 …. Gly-C14 …. Khorana、Nirenberg和Ochoa等又进一步确定 和验证了全部密码子 1968 Nirenberg 和 Khorana 因破译遗传密码 的贡献而获Nobel 奖(1966) 二、概念 1. 遗传密码:DNA 或 mRNA 中的核苷酸序列与蛋 白质中氨基酸序列的对应关系。 2. 密码子:由三个相邻的碱基编码一种氨基酸的核 苷酸三联体。 具有四大生物系统(病毒、细菌、动植物)的通 用性和保守性 (Mt除外) 遗传密码表. 三、遗传密码的基本特性 1、密码的基本单位:按照5 ’-3 ’方向编码,不重叠、 无标点的三联体密码子。 AUG为Met兼起始密码子(兼职性),UAA、UAG、 UGA为终止密码子,其余61个密码子对应于20种氨基酸 UAA :赭石型密码子 UAG :琥珀型密码子 UGA :

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