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- 2018-04-21 发布于海南
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鸡新城疫抗体水平结果 鸡新城疫抗体滴度的检测
鸡新城疫抗体水平结果 鸡新城疫抗体滴度的检测
鸡新城疫抗体滴度的检测
(红血球凝集抑制法)
1 红细胞血凝与血凝抑制的原理
红细胞凝集的实质是红细胞膜上的特异性抗原(凝集原,agglutinogen)和相应抗体(凝集素,agglutinin)发生抗原抗体反应。当病毒的悬液中先加入特异性抗原,且这种抗原的量足以封闭病毒颗粒或其凝集素时,则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其凝集素直接接触,这是红细胞的凝集现象就被抑制,称为红细胞凝集抑制,也称为血凝抑制反应。新城疫病毒属于副黏病毒属,是最主要的红细胞凝集性病毒,具有神经氨酸酶(NA)和血凝素(HA),可使红细胞凝集。 2 实验材料
鸡新城疫抗原(NDV,南京天邦生物科技有限公司);生理盐水;肝素钠;96 孔 V 型微量血凝板;微量移液枪
3 红细胞凝集
3.1 1%鸡红细胞悬液的制备
取无免疫过的成年公鸡,翅静脉采血 10~15 mL,肝素抗凝,2000 r/min 离心 10 min,弃上清,注意要将血细胞泥表面的一层薄膜洗净。然后用血细胞泥 5~10 倍的PBS洗涤,2000 r/min 离心 10 min,弃上清,如此反复洗涤 3 次至上清液透明,弃上清液后得到红细胞泥。再用PBS配成 1%鸡红细胞悬液(红细胞泥:PBS=1ml:100ml)。4℃保存,不超过5d。
3.2 红细胞凝集(4 单位抗原的滴定)
在 96
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