发酵工程第七章.pptVIP

抗生素的生物合成机制与代谢调节 一、次级代谢与初级代谢的关系 基本概念 初级代谢：是指微生物合成它们生长所必需的物质的诸如：糖、氨基酸等以及由这些化合物形成的高分子物质如：多糖、蛋白质、核酸等的代谢，称之为初级代谢。那么，这些化合物统称之为：初级代谢产物。 次级代谢：是指微生物在生长后期进行的与他们的生长无明显关系的代谢，这一类的物质统称之为：次级代谢产物。例如：抗生素、激素、某些酶制剂等。 其特点为：结构比较复杂，其合成的代谢过程比较复杂，大部分的合成机制到目前为止，尚没有搞清楚。 从菌体代谢途径上看两者之间的关系 许多抗生素等次代谢产物的基本结构是由少数几种初级代谢产物构成的，所以次级代谢产物是以初级代谢产物为母体衍生出来的，次级代谢途径并不是独立的，而是与初级代谢途径有密切关系的 Glucose  C3 丝氨酸 甘氨酸 莽草酸 丙酮酸 Val 次级代谢产物 芳香族氨基酸 芳香类次级代谢产物 丙二酰辅酶A 乙酰辅酶A 脂肪酸 次级代谢产物 TCA循环  草酰乙酸、α-KGA 谷氨酸 Met 天冬氨酸 次级代谢产物 次级代谢产物 从代谢调控上看两者之间的关系 两者都分别受到微生物的代谢调节控制，但在代谢调节上，两者又是相互影响的。研究表明：当抗生素合成的初级代谢途径受到控制时，即，Val对α—乙酰乳酸脱氢酶产生反馈抑制时，青霉素的生物合成必然受阻。从这种意义上讲，研究次级代谢的调节与控制要比初级代谢复杂得多，因为初级代谢的控制直接影响到了次级代谢。 以青霉素的合称为例： Glucose 丙酮酸 + 丙酮酸 （焦磷酸硫胺素，TPP） 活性乙醛 α—乙酰乳酸脱氢酶 α—乙酰乳酸 Val  青霉素 选育α—乙酰乳酸脱氢酶对Val不敏感的菌株，则可以提高青霉素的产率。 抗生素的生物合成途径 抗生素的生物合成途径是比较复杂的，目前有许多抗生素的生物合成途径尚不清楚，还有许多是属于推测性的。 抗生素的代谢调节机制 微生物体内有着微妙而科学代谢调节系统，在微生物体内存在多种生化反应，也就有多种的酶参入，这些酶的活性很大一部分是受到其代谢产物的调节与控制的，但是调节与控制的方式是不同的。总体上讲，存在两大类酶活性调节方式 抑制：酶活性的抑制，对于多酶体系，则有：协同、增效、同工酶等 阻遏：酶合成的阻遏 在抗生素的生物合成过程中，由于存在极为复杂的生物化学过程，也就存在极为复杂的调节与控制机制 菌体由生长型到产物积累性的转变 次级代谢产物的合成只有在菌体完成增殖并停止生长以后，才有产物的生成。 菌体是如何完成这种转变的呢？ 在大多数的抗菌素发酵过程中，控制培养基中的特定的营养成分，当微生物达到生长平衡后，由于培养基中的特定的营养成分的减少，微生物停止生长，微生物群体则实现了从对数生长型到产物积累型的转变 例如：庆大霉素的发酵（放线菌）在菌体的增殖期，菌丝体细长，而进入庆大霉素的合成期，菌丝体变得粗短。 磷酸盐调节 磷酸盐对抗生素发酵的影响具有双重性，主要表现在： 高浓度的磷酸盐对抗生素的生物合成具有抑制和阻遏作用，例如：链霉素、金霉素、四环素等，现已发现有32种抗生素受到磷酸盐的抑制和阻遏。 磷酸盐浓度低时，菌体生长速度缓慢，生长量（菌体浓度）也不够，不利于抗生素的生物合成。 高浓度的磷酸盐对于抗生素合成的影响机制有以下两种情况： 抑制或阻遏抗生素合成途经中的某些关键酶。 已有许多研究证明：当磷酸盐的浓度≧10mmol/L时，菌体内与抗生素合成有关的酶的活性将受到抑制。 高浓度的磷