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免疫学检查的应用范围 1．感染性（传染性）疾病的诊断 2．肿瘤免疫学检查 3．免疫功能评价（免疫缺陷） 4．自身抗体检测 广泛用于疾病诊断、机理研究、疾病预防。 免疫学检查的特点 1．主要检测特异性或非特异性的抗原、抗体或免疫活性细胞，或参与免疫的其它成分。 2．是疾病诊断的间接方法 3．交叉性、延时性 -- 正确解释结果 4．正常值问题 5．是一项具有广泛应用及发展前途的学科。 临床免疫（免疫诊断） 的学习方法 基本原理： ELISA，凝集反应… … 每项检验的检测目标是什么 如何评价检验结果 常用血清学检验 一、伤寒、副伤寒血清学诊断 * 1. 肥达氏（Widal）试验 原理： 检验 伤寒、副伤寒抗体 O-菌体 甲 H-鞭毛 乙 H抗原 Vi-体表 丙 评价: 正常人有一定滴度凝集价 （接种、交叉感染） TO1:80 TH1:160 甲、乙、丙 H1:80 动态4倍以上 延时性 1周 10% 2周 60%～70% 4周 90% 阴性结果解释 2. 酶联免疫试验（ELISA） Enzyme-linked immunosorbant assay 原理：间接ELISA检测IgM 抗原：伤寒杆菌脂多糖、Vi抗原 评价： 抗体出现较肥达氏反应早，1周 正常人阴性或1:20以下 Vi抗体阳性1:20以上，提示慢性带菌者。 3. 胶乳凝集试验 原理：检测抗原 抗Vi、O、H抗体+胶乳颗粒--胶乳抗体与血、尿中抗原反应，出现凝集反应。 评价：正常人为阴性或 O1:80，H1:160 早期检测。 二、斑疹伤寒血清反应 Weil-Felix（外-斐氏反应） 原理：检测抗体 变形杆菌 OX19、OX2、OXk 与立克次体有交叉抗原性 三、Brucellaceae菌病血清反应 原理：检测特异性抗体 用牛Brucellaceae菌作为诊断菌液 凝集反应 评价： * 2周后出现抗体 * 3~5周 1:160以上 四、抗链球菌溶血素“ O” * 原理：A族溶血性链球菌 链球菌溶血素O（streptolysin O) 红细胞破坏 评价： * 正常ASO 400 U * 感染后1周上升，4～6周80% 阳性 * 高Ch、巨球蛋白血症、MM 可增高 五、C 反应蛋白 * 原理：与肺炎双球菌 C多糖体反应的急性时相反应蛋白。具有激活补体、促进吞噬、免疫调控的作用。 方法： 单向免疫扩散、胶乳法、ELISA法 抗CRP与血清中CRP反应 六、嗜异凝集反应 * 原理：IgM嗜异性抗体 凝集异种动物红细胞 评价： * 正常人阴性或凝集价 1:8 * 发病后1周升高，2~3周达高峰 * 非特异性：Hodgkin、血清病 七、冷凝集素试验 原理：肺炎支原体感染后，血清中产生“ 寒冷红细胞 ”凝集素。自身红细胞或“ O”型红细胞 0～4℃凝集，37 ℃散开。 评价： * 2周后上升，1:32，4周后达高峰 * 流感、传单可呈阳性反应，但 滴度低。 八、冷球蛋白检查 原理：草酸钠抗凝，分离血浆，分别置于4℃、37℃ 直立72小时, 4℃中可见沉淀 评价：* SLE 15％ ~35％阳性 提示疾病活动 * 非特异性 九、流行性出血热血清学检查 原理：感染出血热病毒肺癌传代H549细胞株 ＋患者血清＋荧光标记抗 IgG或 IgM ? 细胞浆中出现黄绿色荧光 评价：抗 IgM标记 3～6天 抗 IgG标记 2周 十、梅毒血清学检查 1. 未灭活血清反应素试验 （unheated serum reagin test, USR） 梅毒螺旋体破坏组织，产生心磷脂，生成反应素。 十一、AIDS的血清学检验 1. 间接免疫荧光法 原理：检测HIV抗体 感染HIV的淋巴细胞＋血清＋荧 光染色 2. 病毒检查法 原理：分离感染淋巴细胞?培养?上清 液逆转录酶 十二、肝炎病毒的检测 甲肝病毒：RNA病毒 HAV－Ag 发病前二周即可从粪中检出， 两周后消失 HAV－RNA：对早期诊断具有特异性 HAV-IgM ：病毒衣蛋白抗体 发病2周100%阳性，一年消失。 对于急性期患