第三讲 科研选题.pptVIP

那么除了单链RNA (正义或反义RNA) 外,还有什么成分呢? Fire A 很快就联想到,根据自己既往的研究结果和他人的文献报道,研究用的RNA 在体外转录制备过程中尽管特异性很高,但却不可避免地会随机产生微量的具有双链NA(dsRNA) 特性的产物,即研究用的正义或反义RNA中可能混有微量的双链RNA。 ----显然这是建立在逻辑推理基础上的一种全新假设和思维创新,与传统的反义RNA 思维有本质不同。 dsRNA 是否与基因阻抑有关? 他采用凝胶电泳将正义RNA 和反义RNA 纯化,同时故意将纯化后的正、反义RNA混合在一起,制成dsRNA 杂合体,注入线虫。 Fire A 决定通过实验将其明确！ 纯化后的反义RNA 基因阻抑作用显著减弱,而dsRNA 杂合体却高效、特异地阻断了同源mRNA 表达, 其阻断作用超过反义RNA 至少100 倍以上！ 奇迹发生了！ 这一令人吃惊的结果意外地证实了dsRNA 在基因阻抑中发挥着重大作用,Fire A 将dsRNA 的这一作用称之为 RNA interference（ RNAi) 。1998 年, 当Fire A 的研究结果在Nature 杂志一经公布, 迅即震惊了整个生命科学界。全球迅速掀起了RNA 干扰研究热潮, 因为很快科学家和风险投资基金就已意识到了RNAi 所孕含着的巨大科学价值和商业前景。 生命科学界和商界震惊了！ 2 .RNA 干扰的意义 经过几年的研究,现已初步阐明, RNA 干扰是因注入真核细胞后,激发真核细胞内防御反应,生成dsRNA 诱导的沉默复合体,将与dsRNA 具有同源序列的mRNA 降解,导致基因在转录后水平沉默,丧失表达蛋白或多肽能力而引起。其作用类似于基因剔除,但远比基因剔除简单易行,安全性高,因不真正剔除基因,可以避免基因误剔除带来的严重后果,现已广泛应用于： 目前包括人类在内的很多生物体基因组测序工作已经完成,发现了大量功能未明的新基因。明确这些新基因的功能,其价值不言而喻。根据反向生物学研究策略,利用RNAi 关闭某新基因表达,观察其表型变化,是研究这些新基因功能的最佳捷径。 2. 1 　研究基因功能　 　 细胞内信号转导基因上下游关系错综复杂,采用传统方法确认常很困难。利用RNAi 技术,关闭某信号基因表达,通过“拉闸”,观察信号转导通路效应变化,可使信号转导基因上下游关系确认变得容易。 2. 2 　确认信号转导基因上下游关系 病毒、肿瘤、自身免疫性疾病目前治疗仍很困难。RNAi 技术有可能成为对付这类疾病的最新最有力武器,为这类难治性疾病治疗带来革命性突破。 2. 3 　基因治疗　 利用RNAi 技术,使与病毒复制、肿瘤细胞分化生长、自身免疫因子过度表达密切相关的致病基因沉默,从而阻断病毒复制,使肿瘤细胞凋亡,免疫因子表达恢复正常而达到治疗目的。 主要策略: RNAi 对艾滋病毒、乙肝病毒、流感病毒、SARS 相关冠状病毒复制产生了强大的抑制作用。 哈佛大学研究表明, RNAi 通过阻断Fas 受体表达,使自身免疫性肝炎小鼠肝纤维化、肝衰竭显著减轻, 小鼠存活率显著增加 RNAi 在白血病、肺癌等癌肿抑制研究中也取得了令人振奋的成果。 2005 年,全球第一个RNA 干扰药物进入临床试验。 主要研究进展: RNAi 发现于意外,但却孕含着很多的科学哲理,它的发现过程给我们带来了诸多启示: 3. 1 　要敢于科学突破　不要认为科学突破只属于那些大科学家、大研究机构,不要认为科学突破遥不可及而心存畏惧,不以为之。其实有时科学突破是一种机遇,要志存高远,有敢于科学突破的观念、勇气和决心。 3 RNA 干扰发现带来的启示 3. 2 　要善于抓住科学突破的机遇 　要密切追踪学科研究前沿,尤其是要养成经常性浏览Science、Nature、Cell 等世界一流杂志的习惯,注意从已报道的前沿研究中去发现尚未解决的问题,特别是留意那些用传统理论或技术无法解释或相矛盾的研究结果,并以此为突破口,深入探索。 “机遇只垂青于有准备头脑的人” 。Fire 正是在Cell 杂志上发现了Guo 博士与传统解释不符的研究报告,并以此立题才实现了后来伟大的科学突破。 其二, 要真实地进行自己的实验研究,在实验中细心观察,一旦发现意外或奇怪现象就要敏锐抓住,并紧抓不放,以打破砂锅问到底的精神弄清真相,而不要盲从别人,轻易否定自己的实验结果和放弃。科学突破往往就隐藏在这些不合常规的意外之中。Guo 博士最终错过了发现RNAi 的历史机遇,也可能与她未能坚持不懈、探索到底有一定关系。 3. 3 　要有创新性思维　 RNAi 的发现,创新性