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致病性腊样芽胞杆菌pcr及real-time pcr 检测方法与检测试剂盒研究
论文题目:重组鸡痘病毒疫苗、核酸疫苗的构建及实验免疫研究 国家“863”课题,军内课题 * 口蹄疫一直以来都以其严重的危害程度被国际兽疫局列为一类传染病之首。本病传染性极强,不仅导致牲畜的使役能力下降,而且对人类健康也造成严重的威胁。尤其是恶性口蹄疫,幼畜可直接造成死亡。 * 吉林出入境检验检疫局 致病性蜡样芽胞杆菌PCR及real-time PCR 检测方法与检测试剂盒的研究 Study on using PCR and real-time PCR method for detecting Pathogenic Bacillus cereus and relative detecting kit 课题编号:2005JL007 主要完成人:王振国 刘金华 肖成蕊 罗雁菲 蔡 阳 刘和平 魏春艳 吴连鹏 王伟利 孟日增 牟 峻 石建平 卢利军 吴 剑 宋立国 赵庆松 * 尽管科学技术的发展已到了相当高的水平,但在保证食品的安全性问题上,不管是发展中国家还是发达国家,食物中毒仍然严重危害人们的身体健康,是当今世界最受关注的卫生问题之一 。 据世界卫生组织估计,目前被认知并得到报告的食物中毒仍然只占实际发生的很少一部分。从全球的角度看,发展中国家实际发生的和所报告的病例数之比可能为 100 : 1 ,发达国家可能不足 10% 。因而可以肯定地说,除了已经报告的食物中毒外,还有大量的食物中毒或其他食源性疾病因为各种原因而未报告。 据我国各地上报的数据,我国平均每年有近 5 万人因食物中毒而使健康受到损害,每年因食物中毒死亡 300 多人。 前 言 * 蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus) 属于芽胞杆菌属,是一种革蓝氏阳性杆菌,大小为1~1.3×3~5μm,兼性需氧,形成芽胞,芽胞不突出菌体,菌体两端较平整,多数呈链状排列,与炭疽杆菌相似。 蜡样芽胞杆菌在自然环境中广泛存在。在8~55℃的温度范围内均能生长,最适生长温度为28~35℃。蜡样芽胞杆菌耐热,其游离芽胞能耐受100℃30分钟,而干热灭菌需120℃60分钟才能杀死。引起食物中毒的菌株多周生鞭毛,有活动力。 蜡样芽胞杆菌能引起两种类型食物中毒,①呕吐型:由耐热的肠毒素引起,于进餐1~6h发病,主要是恶心、呕吐,仅有少数有腹泻。类似于葡萄球菌的食物中毒。②腹泻型:由不耐热肠毒素引起,进食后发生胃肠炎症状,主要为腹痛、腹泻,偶有呕吐和发热。 该菌有时也是外伤后眼部感染的常见病原菌,引起眼球炎。在免疫功能低下或应用免疫抑制药的患者中还可引起心内膜炎、菌血症和脑膜炎等 前 言 蜡样芽胞杆菌概述 * 蜡样芽胞杆菌与食物污染 蜡样芽胞杆菌极易通过水源及植物性原料进入食物链污染食物从而引起食物中毒,特别是在一些碳水化合物和蛋白质含量丰富的食品中,如米饭、各类点心食品、奶制品、肉类、调味品蜡样芽胞杆菌更为多见。其中由谷类食物所引起的肠胃炎大都是由于蜡样芽胞杆菌的污染所致,调查表明绝大多数的谷类食品都含有蜡样芽胞杆菌,其中油炸及蒸煮的谷类食品所引起的食物中毒95%都是由蜡样芽胞杆菌的污染所致。 前 言 * 统计资料显示在西欧及北美以腹泻型蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒比较多,而在日本呕吐型蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒比较普遍。 前 言 蜡样芽胞杆菌在世界各地流行情况 据报道1990年在挪威,蜡样芽胞杆菌是食源性疾病中分离最多的微生物之一; 在芬兰爆发的其病原已被确定的食源性疾病中,蜡样芽胞杆菌占14%; 在对德国陆军从1985到2000年期间由食物引起的爆发性疾病的调查结果表明,蜡样芽胞杆菌是从食物中分离频率最高的病原微生物,大约42%的爆发性疾病由蜡样芽胞杆菌引起; 从1980年到1995年间,在澳大利亚所发生的细菌性食物中毒事件中有7.4%是由蜡样芽胞杆菌所引起; * 2001年4月26日中午,吉林省辽源市某小学,92人出现食物中毒症状,经当地防疫部门化验证实由蜡样芽胞杆菌污染了所致。 2002年4月18 日,慈利县岩泊渡镇中学76名师生因食用被蜡样芽胞杆菌污染的过夜合渣后发生食物中毒。 2003年6月5日,牡丹江市发生中学生集体食物中毒事件。发病学生20例,经临床、流行病学资料分析及病原学检验,证实这是一起由于食用了被蜡样芽胞杆菌污染的米饭所引起的细菌性食物中毒。 ? 2004年6月17日,赤峰林西县工商局家属楼建筑工地26名湖北籍民工因食用被蜡样芽胞杆菌污染的剩米饭发生食物中毒。 2004年9月13日,邢台市某中学
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