第二部分 淀粉样蛋白显像剂11C-PIB国产化及临床应用效益研究.doc

第二部分 淀粉样蛋白显像剂11C-PIB及是一种进展性的神经变性疾病，表现为不可逆的认知功能丧失、记忆障碍和行为改变诊断金标准只能根据尸解的病理脑切片观察。AD患者脑组织中存在特征性的β-淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）沉积性老年斑和神经纤维缠结增多。活体Aβ检测的，不仅能，也可以动态监测AD的发展过程。正电子发射断层扫描[1]在2001年首次合成淀粉样蛋白示踪剂[N-甲基-11C]2-[4’-(甲氨基)苯基]-6-羟基苯并噻唑[2-6]先后对制备方法进行探索和改进，目前采用的方法多用三氟磺酸甲酯11CH3OTf）对PIB标记前体6-OH-BTA-0进行甲基化标记，然后采用乙腈水溶液做流动、制备高压液相色谱法进行分离纯化，收集的成分用C-18小柱除去乙腈。材料与方法 1.1.0 mol/L氢化锂铝/四氢呋喃（LAH/THF）溶液(德国ABX公司) 2.氢碘酸（HI）质量分数60％HI AR（美国Sigma-Aldrich公司) 3.6-OH-BTA-0及标准品6-OH-BTA-1（德国ABX公司） 4.6-OH-BTA-0（自制） 5.乙酸(分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司) 6.三乙胺(分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司) 7.无水乙醇(分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司) 8．乙腈（HPLC级，中国医药集团上海化学试剂公司） 9.丙酮(分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司) 10.丁酮（分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司） 11.氯化钠试剂（分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司） 12.FA2004上皿电子天平(上海精科天平) 13.固相 C18 cartridge柱(美国waters公司) 14.3ml反应瓶(北京派特生物技术有限公司) 14.无菌滤膜Millex-GS(美国Millipore公司) 16.CRC-15R型放射性活度检测器(美国Capintec公司) 17.分析型高压液相色谱HPLC系统(美国Waters公司)，配LB508型放射性检测器(德国Berthold公司) 18.反相Hypersil C-18柱 (ODS2 5um，4.6mmx250mm，中国大连依利特分析) 19.多功能合成模块和PET-II型自动化碘代甲烷仪(江苏大华电气有限公司) 20.RDSI11加速器(美国CTI公司)及住友公司加速器（日本住友公司） 21.PET扫描仪型号为Siemens Biograph 64 PET/CT。 二、药物制备方法及路线： [l1C]6-OH-BTA-1的质控标准建立：由于本品目前没有国家标准，参考国家发行的《正电子类放射性药品质量控制指导原则》制定了本品的质量标准。根据规范合成了3批[l1C]6-OH-BTA-1注射液成品(放于2.5mL注射器内，外包装为钨钢保护套)，常温下在3个半衰期(60分钟)内对放化纯度做跟踪检测的稳定性试验。 1. 标记中间体11C -三氟磺酸甲酯（11COTf）的制备： 14N (p ,α) 11 C在加速器靶内生成11CO ，传到放入液氮的Loop环内，捕获完毕后，移开液氮。通过PET-II型自动化碘代甲烷仪，11CO缓慢传至装有0.2 m的 1.0 mol/L氢化锂铝/四氢呋喃溶液反应管中反应，蒸发多余的四氢呋喃后加入0.3-0.4 m的HI，生成的11CH3I由氮气载带经过干燥处理11CH3I蒸通过灼热的三氟磺酸银转换成11CH3OTf[6]。反应式如图图2-1：标记中间体的反应路线 2. 放射性标记11C-PIB参考Solbach等的方法，使用1 mg进口试剂或6.0-8.0mg国产试剂PIB标记前体（6-OH-BTA-0）溶于丙酮中，摇匀后装于mL的特制密闭锥形反应瓶，置于盐冰浴中。反应瓶入口端通入11CH3OTf的氮气流，出口端接尾气。待反应瓶所测放射性最大，将密闭反应瓶置入80℃水浴中加热1 min，。[11C]6-OH-BTA-1提纯：反应好的液体加入5ml注射用水稀释，柱除去杂质，该柱事先使用10ml无水乙醇活化。再用ml乙醇洗脱保留在柱上的产品。经无菌注射水稀释和0.22μm的微孔无菌滤膜过滤，得澄清 [11C]6-OH-BTA-1注射液。的固相C18柱；流动相：60%乙醇溶液。最终收集的产品用生理盐水稀释乙醇质量分数为10%后，经微孔无菌滤膜过滤，得澄清11C-PIB溶液（反应式见图2-2）。[4]标记，PIB标记前体称取6-8mg，使用制备HPLC纯化粗产品时，采用乙腈/0.1 mL碳酸氢铵溶液（40/60，V/V）做流动相，收集产品后，将产品装载于C-18小柱，空气排干，用10 mL注射用水清洗，用1.0 mL无水乙醇将产品从柱洗脱收集瓶中，加9.0 mL生理盐水稀释，经微孔无菌滤膜过滤，得澄清 11C-PIB溶液。 图2-2. 1