第10讲DNA生物合成.docVIP

第十章 DNA的生物合成 学习要求 1．掌握 遗传信息流动的中心法则；DNA的生物合成的方式；复制的基本规律、主要物质及其作用机理；原核生物DNA复制的基本过程及各阶段特点；端粒和端粒酶的概念。 2．熟悉 DNA复制的保真性依赖三种机制；真核生物DNA的合成过程；逆转录；突变的概念及类型。 3．了解 半保留复制的实验依据及意义；其他复制方式；DNA损伤及其修复的机制；突变的意义及引起突变的因素；DNA修复的类型；其他复制方式。 基本知识点 中心法则阐明了遗传信息传递的规律。复制是遗传物质的代代相传，通过转录和翻译，遗传物质表达为执行生命活动功能的各种生物大分子。生物细胞内的DNA复制有半保留性、高保真性、半不连续性和双向性等特征，对理解复制过程及其意义都十分重要。半保留复制是DNA复制的基本特征，并通过实验证实。复制的保真性至少依赖三种机制：遵守严格的碱基配对规律；聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能；复制出错时有即时的校读功能。复制的半不连续性可理解复制过程中领头链和随从链的区别。复制的双向性阐明复制叉的形成及其延伸、汇合。 复制以dNTP为原料，在DNA聚合酶催化下生成磷酸二酯键使dNMP逐一聚合生成DNA子链。原核生物有DNA-pol I、II和III三种DNA聚合酶；真核生物有α、β、γ、δ、ε五种DNA-pol，各有独特的功能。复制还需多种其他酶和蛋白质辅助因子的参与。 原核生物的复制过程已相当清楚，其起始是将DNA双链解开成复制叉，形成引发体及合成引物。在解螺旋酶的作用下解开双链，另外还需有单链DNA结合蛋白。而后形成有解螺旋酶、DnaC、引物酶和DNA的起始复制区域的复合结构称为引发体。在引物酶的作用下形成引物。复制的延长由引物或延长中的子链提供3＇-OH，供dNTP掺入生成磷酸二酯键，因此子链总是从5＇→3＇方向延伸。DNA双链走向相反而解链只有一个方向，因此领头链连续复制和随从链不连续复制。在电镜下观察到的复制中的不连续片段称为冈崎片段。在复制完成前，RNA引物须除去，留下的空隙由DNA-pol I催化dNTP的聚合而填补，片段之间的缺口由DNA连接酶连接使之成为连续的子链。原核生物环状DNA是单复制子复制，起始点向终止点汇合而终止复制。 真核生物复制发生于细胞周期的S期，起始过程需要DNA-polδ、α及多种蛋白质因子、细胞周期蛋白及其相应的激酶（CDK）参与真核生物复制的调节。复制的延长中发生DNA聚合酶α和δ转换，且延长和核小体组蛋白的分离和重新组装有关。染色体复制能维持应有的长度，复制的终止需要端粒酶延伸端粒DNA。 逆转录是RNA病毒的复制形式。逆转录过程包括以RNA为模板合成单链DNA、杂合双链上RNA的水解以及再以单链DNA为模板合成第二条DNA互补链三个步骤。在感染病毒的细胞内，逆转录酶能催化上述三步反应。在基因工程操作上，还可用逆转录酶制备cDNA。滚环复制是原核生物染色体外的基因组复制方式，D-环复制是真核生物线粒体DNA的复制方式。 DNA复制过程出现错误是突变发生的原因。从生物的进化、分化来看，突变是有积极意义的。从原因上说，突变除了自发突变的外，还可因各种物理、化学因素而诱发。物理因素诱发突变如常见的嘧啶二聚体、化学诱变剂种类繁多，而且往往与致癌作用有关。细胞内存在各种修复措施，使损伤的DNA得以复原。主要的修复方式有错配修复、直接修复、切除修复、重组修复和SOS修复等。 自测练习题 一、选择题 （一）A型题 1．按中心法则遗传信息传递的方向是 A．DNA→DNA→RNA→蛋白质 B．RNA→RNA→mRNA→蛋白质 C．DNA→RNA→tRNA→蛋白质 D．RNA→DNA→rRNA→蛋白质 E．RNA→RNA→rRNA→蛋白质 2．基因表达是指 A．复制与转录 B．转录与翻译 C．复制与翻译 D．转录与加工 E．翻译与加工 3．基因表达产物是 A．DNA B．RNA C．蛋白质 D．RNA 和蛋白质 E．DNA和RNA 4．实验证明DNA半保留复制的是 A．Watson B．Sanger C．Wringht D．Messelson和Stahl E．Nierenberg 5．DNA复制所需原料是（N表示A、G、C、T） A．NTP B．NDP C．dNTP D．dNDP E．dNMP 6．DNA复制的产物是 A．DNA B．RNA C．蛋白质 D．以上都是 E．以上都不是 7．参与DNA复制的酶不包括 A．DNA-pol B．RNA-pol C．连接酶 D．引物酶 E．拓扑异构酶 8．原核生物DNA复制延长中真正起催化的酶是 A．