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如果纤维素酶的合成受反馈阻遏作用的调控，如果根据这一调控机制设计纤维素酶高产菌的选育方案？ 主要在合成代谢途径中，终产物或其衍生物对该途径上一个或多个酶形成的抑制作用。 1．1降解纤维素微生物的分类 将具有降解天然纤维素能力的微生物归为一类，这是基于生理功能的分类方法。由于作为植物残体主要组分的纤维素在自然界中有着广泛的分布，细菌、放线茵和真菌中都有具有分解纤维素能力的类群。 分解纤维素的好氧细菌中，研究比较多的有噬纤维茵属(Cytophaga)、生孢噬纤维茵属(Sporocytophaga)和纤维单胞茵属(Cellulomonas)等。厌氧细菌中以热纤梭茵(Clostridium thermocellum)的纤维素酶系研究得最深入。有关产生纤维素酶的放线茵研究很少．分解纤维素能力较强的放线茵有黑红旋丝放线茵(A．melanocycles)、玫瑰色放线茵(A．roseus)、纤维放线茵(A cellulosae)及白玫瑰放线茵等。由于细菌产生的纤维素酶多半不分泌到体外去，即使某些细菌有很强的纤维分解能力，也不能直接用于纤维素酶制剂的生产。 目前，用于工业生产纤维素酶的微生物大多属于真菌：有木霉属(Trichoderma)、曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、根霉属(Rhizopus)及漆斑霉属(Myrothecium)等。其中木霉、青霉产生的纤维素酶活力往往最高，酶组分最全，应用较广泛。曲霉和根霉产生的主要是内切型纤维素酶，多用于纺织、造纸等纤维的表面加工。 1．2降解微生物的选育过程 一般从自然界筛选分离的野生型菌株产酶能力比较低，不能达到工业生产的要求，因此要对菌种进行改良。为了提高菌种利用纤维素产糖的能力，诱变育种是一个有效的途径。诱变育种常用物理或化学方法。 从应用效果来看，高能电子、Y射线、紫外线可能是木霉属菌种较有效的诱变因子；应用亚硝基胍等诱变剂能够明显提高产纤维素酶菌种的诱变率。只通过一次诱变处理，要获得高活力菌株的可能性是较小的，而通过多次物理化学因素的复合处理，往往可以积累正向变异，使活力逐步提高0。 Mandels等用线性加速器的高能电子流照射木霉野生型母株QM6a的分生孢子悬浮液，剂量为0．05兆拉德(Mrad)时，孢子死亡率在95％ 以上，将存活的孢子涂布在含脱氧胆酸盐的分离培养基上。脱氧胆酸钠可限制霉菌的扩散生长，便于茵落分离。待孢子生成后，转接到土豆葡萄糖琼脂培养基上，长成以后再分离培养在纤维素培养基上。经这样处理后，获得一株变异株QM9123，其纤维素酶活力比母株QM6a提高2倍以上。进一步诱变处理得到变异株QM9414，其纤维素酶活力比QM6a提高近4倍。 葡萄糖等易代谢碳源能引起降解物阻遏效应，阻遏纤维素酶等难降解底物的水解酶的生物合成，是影响纤维素酶产量提高的主要限制性因素。为提高诱变育种的效率，美国Montenecourt等人设计了磷酸膨胀纤维素一甘油平板，选出了一株瑞氏木霉抗甘油阻遏突变株NG14．并进而选出c一30突变株，对葡萄糖也有抗阻遏特性，纤维素酶活性得到明显提高。山东大学的研究者改进了抗阻遏突变株的筛选方法，选出的一株纤维素酶高产菌株斜卧青霉(尸．decumbens)JU1，具有明显的抗降解阻遏特性，可在含有大量可溶性糖的培养基上合成纤维素酶。这就为其快速生长和利用含糖废液作培养基提供了可能。 利用分子生物学相关手段对复合纤维素酶系统改造可以改变酶的催化性质，现在三个主要的研究方向为：① 基于对纤维素酶结构和功能关系认识的基础上进行理性设计；② 进行定向进化，通过提高基因内的突变率或DNA重组使酶获得新的催化性质；③通过纤维素酶系的重组与构建，来改进纤维素酶的性质或提高其比活性。 纤维素酶系统的组成和协同作用 天然纤维素的组成具有异质性特点，表现为纤维素结晶度的不同，并含有半纤维 素、木质素以及胶质。微生物要产生多种酶来降解天然纤维材料，使其转变成可溶性 的糖(主要是纤维二糖、葡萄糖和木糖等)，进而为细胞所利用 在这一过程中起作 用的酶的集合称为 纤维素酶系统“0。 纤维素酶系统中各成分已经按照催化作用的模式进行了分类，近年来又基于氨基酸序列的相似性等特征进行了更进一步的分类。。纤维素酶系统中降解纤维素相关的组分按功能分主要有三大类：① 内切葡聚糖酶(Endo一1，4一glucanase，EC 3．2．1．4)，② 外切葡聚糖酶(Exo一1，4一glucanase，EC3．2．1．91)，③ 葡萄糖苷酶(1，4一fl-glucosidases，EC 3．2．1．21)。内切葡聚糖酶(以下