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高效液相色谱法(HPLC) high performance liquid chromatography 黑龙江省药检所 姜连阁 Jiangliange @ 分离原理 按溶质在两相过程中的物理化学原理分类 分配色谱:—分配系数 亲和色谱:—亲和力 吸附色谱:—吸附力 离子交换色谱:—离子交换能力 凝胶色谱(体积排阻色谱):—分子大小而引起的体积排阻 各种液相色谱法的比较 主要HPLC方法的特性 色谱模式在给定的应用中主要取决于填料的性质，应当注意除主要保留机制之外，还可能有其它辅助的机制存在。 大多采用键合相色谱法，将极性或非极性基团化学键合在硅胶基质上作为固定相。分离是基于化合物在固定相和流动相中的分配。 色谱系统由极性固定相和非极性流动相组成，称为正相色谱法（NPC）。反之，非极性固定相和极性流动相，为反相色谱法（ RPC）。 反相HPLC法是最常用的高效液相色谱法。 主要HPLC方法的特性 分离选择性 保留时间、峰面积重现性 流动相组成； （溶剂、缓冲pH） 固定相组成； （色谱柱\填料粒度\柱长） 温度． 流速 目的：定性、定量 改善色谱分离选择性的方法 1．调节流动相的极性 2．向流动相中加入改性剂 （1）离子抑制法 （2）离子强度调节法 影响离子对色谱分离选择性的因素 1．溶剂极性的影响 2．离子强度的影响 3．pH值的影响