细菌的检查与防治.ppt

第7章 细菌感染的检查方法与防治原则 一、目的与要求 1、掌握细菌感染的检查程序 3、了解人工免疫的概念 2、掌握感染标本采集原则 第一节 病原学诊断的基本原理 ——①患者体内有病原体存在 病原学诊断的内容与方法 第二节 病原体分离鉴定 一、标本采集原则 1、无菌操作：避免其他微生物污染。 2、采集不同标本：根据病原体的分布和排出部位， 采集不同性质的标本。 3、用药前采集标本：使用抗菌药物之前采集标本。 4、取病变明显部位标本：病变明显部位标本含菌量 多，有利于获得阳性结果。 5、尽快送检：采集的标本需立即送实验室检查。 6、低温保存：不能立即送检标本，需低温保存。 7、抗体效价：血清学检查需注意抗体效价，必要时需在急性期和恢复期各做一次试验。 8、做好标记：在标本的容器上注明标本名称、来源、性质、日期等标记。 二、直接涂片镜检 直接涂片镜检既有助于病原学的早期初步诊断， 也有助于指导选择药物进行早期治疗。 适宜直接涂片镜检的常见疾病及其检查方法与结果 直接涂片镜检的意义 1、早期初步病原学诊断 2、指导进一步检查 3、判断厌氧菌感染的参考 4、指导早期选择和使用药物 三、病原菌分离培养 1、细菌感染标本的采集 1、根据病情采集标本：根据患者病情、病程、病原体的分布与排出情况，采集不同时间、性质的标本。 2、无菌操作：是正确细菌学诊断的保障。 3、取病变明显部位的标本：有利于检出病原菌。 4、用药前采集标本：用药后标本内可含高浓度药物，影响细菌的分离培养。 5、及时送检:避免病原菌死亡或污染菌生长。 6、低温保存：避免病原菌死亡或污染菌生长。 7、做好标记：避免标本弄错。 2、病原菌的分离培养 根据动物对细菌的敏感性分离病原 菌。例如用小鼠分离肺炎链球菌、 豚鼠分离钩端螺旋体等。 3、病原菌鉴定 1、生化试验鉴定：根据细菌代谢能力和代谢 产物不同鉴定菌种。 2、动物试验鉴定：根据细菌对动物的致病情 况鉴定菌种或致病性。 3、毒力试验鉴定：是某些细菌毒力鉴定的重 要措施，例如白喉棒状杆菌、肺炎链球菌、 破伤风梭菌、ETEC等。 4、血清学试验鉴定：用已知抗体检测病原菌的抗原，例如玻片凝集试验。 5、分子生物学试验鉴定：检测病原菌的特异性基因或蛋白质等分子物质。 4、药物敏感试验 第三节 免疫学检查 基本原理：感染人体的病原体将其抗原物质带入宿主体内并且刺激宿主机体产生特异性抗体或/和致敏淋巴细胞。 第四节 分子生物学检查 基本概念：在分子的水平上对疾病进行分析、诊断和预测的策略与方法。 聚合酶链反应polymerase chain reaction,PCR 基本原理：模拟体内环境，在体外对核苷酸进行扩增。 PCR扩增能够对核酸进行数百万倍以上的扩增，扩增产物可进行凝胶电泳、SSCP、核苷酸序列测定等分析。 限制性核酸酶图谱restriction nuclease mapping 用限制性核酸内切酶或外切酶切割核酸和电泳分析的方法。 核酸印记nucleic acid blotting 将凝胶电泳后的单链核酸转移至膜上，用核酸探针进行杂交与分析的方法。 核酸杂交nucleic acid hybridization 用标记的核酸探针检测标本内相应单链核酸分子的方法。 核酸序列测定nucleic acid sequencing 分析核酸分子的核苷酸组成与排列顺序的方法。 核酸指纹图谱nucleic acid fingerprinting 用限制性核酸内切酶处理质粒等核酸分子后进行凝胶电泳，对电泳图谱进行分析的方法。 基因芯片gene chip 将不同的单核酸链以点阵法标记于载体上，用于检测标本内互补单核苷酸链的方法。 凝胶电泳gel electronphoresis 将核酸或蛋白质分子在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）内进行电泳，分析其分子量与构像的方法。 蛋白质印记Western blotting 将凝胶电泳后的蛋白质分子转移至膜上，用标记抗体进行染色与分析的方法。 蛋白质序列测定protein sequencing 分析蛋白质肽链的氨基酸组成与排列顺序的方法。 蛋白质芯片protein chip 将不同的蛋白质抗原或抗体以点阵法标记于载体上，用于检测标本内相应的抗体或抗原。 第五节 人工免疫 基本概念：人工方法给机体接种或注射疫苗、抗血清、淋巴因子等，使机体获得特异性免疫力。 一、人工主动免疫 基本概念：人工方法给机体接种疫苗、类毒素等抗原性物质，使机体产生特异性抗感染免疫力。 用途：主要用于感染性疾病的特异性预防。 二、人工被动免疫 常用生物制品： 抗毒素 丙种球蛋白