z组培甜菊糖苷的变化研究.pdfVIP

第 3g卷 第 2期 厦f1大学学报 (自然科学版) Vo1．39 No 2 2000年 3月 JournalofXiamenUniversity (NaturalScience) M ar．2000 文章编号 2000)02—0235—06 j 组培甜菊糖苷的变化研究 S z 叶 罩 ．陈 晦 传 ． 明 山 ．湛 维 庚 6 摘要 ：研究了甜菊组培过程中．甜菊苷(Stevioside缩写为SS)和丽鲍迪苷A(Rebaudioside，缩写为 RA)两种主要甜昧成份 的变化 以及不 同浓度 的6一卞氨基腺苷 (6一BAP)对愈伤组织合成 ss及 RA 的 影响，井初步探讨了根部在糖苷合成过程中的作用 结果表明 甜菊愈伤组织合成糖苷的能力随培养 时间的不 同而异．培养 l0d的愈伤组织可检测到少量残余叶片的 ss及 RA．而培养 20d．30d的愈 伤组织则未检出．培养 40d的愈伤组织仅检测到RA．表 明此时的愈伤组织又恢复了台成糖苷的能 力 ，推测与叶绿体的再分化有关 在含有不同浓度 6-BAP的培养基 中培养 2个月的愈伤组织都能够 合成糖苷 ．但所合成糖苷的组分不同 其 中，在含有 05mg／I．1mg／1．2mg／I，6-BAP培养基中的 愈伤组织 只能积累 RA．且随浓度 的增加 ，RA 的含量逐渐 降低 ；而含有 3mg／I6BAP培养基 中的 愈伤组织 只能台成 sS有根苗可台成 sS及 RA 而无根腋芽苗只能台成 sS 莘中圈分类号：Q343．6、一 文文献黝标识码；缮百～…- 利用组织培养技术生产甜菊糖苷 ，最早见于 Komatsu等人[1的报道 ，并获得 了专利．，Hs— ing口]，Striedner口等人也相继证实所培养 的甜菊愈伤组织具有合成甜菊糖苷 的能力．但 Han— dron]，SwansonEs]等却得出了相反的结果 ，没有检测到甜菊糖苷的合成．其中Swanson进一步 证实 ，只有当甜菊愈伤组织诱导出根后，才能够启动甜菊苷的合成．不过，上述学者对甜菊愈伤 组织培养过程 中SS、RA两种主要甜味成分的变化都没有做进一步的研究． 细胞分裂素(Cytokinin，CTK)是组织培养中不可缺少的植物生长促进物质．在大多数研 究中，认为细胞分裂素对次生代谢产物的合成没有影响．不过在某些实验 中，也观察到某种细 胞分裂素对次生产物的积累有明显的作用 ]．不同的细胞分裂素对于合成次生产物的作用 也不同 ]．6一卞氨基腺苷(6-BAP)是人工合成的细胞分裂素之一，是 6-BA 的衍生物 ，在诱导愈 伤组织的形成方面具有很好的效果，但对于不同浓度的6-BAP对甜菊糖苷合成的影响的研究 还未见报道 ．本文针对上述不同的结果及存在的问题 ，进一步探讨了甜菊愈伤组织合成糖苷的 能力 ，研究不 同浓度 的 6-BAP对愈伤组织合成 SS，RA 的影响 及培养过程中这两种甜味成 收稿 日期 ；1999—05—21 基金项 目：福建省 自然科学基金资助项 目(C97OO7) 作者简介 ：叶军 (197O一)．男，讲师 ． 厦门大学学报 (自然科学版) 分的变化．通过对有根苗及无根腋芽苗的培养 ，在植株的水平研究根对糖苷合成的影响． 1 实验方法 1．1 有根苗、无根腋芽苗及甜菊愈伤组织的培养 无菌苗培养 甜菊种子经 75 的乙醇，0．1 的升汞杀菌后，用无菌水冲洗 5次在无菌条 件下接种于MS固体培养基上，定期更换培养基． 甜菊愈伤组织的培养 取幼苗叶片 ，切成 0．25cm大小，分别接种于MS培养基+2mg／ LNAA+0．5mg／L、1mg／L、2mg／L、3mg／L6-BAP的培养基中，一个月后更换新的培养基 ， 进行继代培养，获得愈伤组织． 有根苗、无