《病原微生物学精品教学》第四章 细菌的遗传和变异-2015.pptVIP

+ 吸附 摄入 重组 突变株 DNA受体 3.影响转化的因素 供受菌基因型： 同源性；亲缘关系近，转化率高 受菌的生理状态： 感受态（competence），正电荷，细 胞膜通透性增高。人工诱导。 环境因素：Mg2＋、Ca2＋等可促进转化 两株菌株之间发生了遗传交换和重组 第一次证实细菌之间可以发生遗传交换和重组，但该实验无法证实这一过程是否需要细胞间的直接接触 多重营养性缺陷型杂交实验 中间基本培养基上长出原养型菌落 1、实验证据： （二）接合 Davis等人进一步证实接合过程是否需要细胞间的直接接触：“U”形管实验： 综上所述，接合作用（Conjugation）是指受体菌和供体菌通过性菌毛直接接触，遗传物质自供体菌移入受体菌，使后者获得前者的部分遗传性状的过程。 “混合”培养 Tatum, E. and J. Lederberg, Gene recombination in the bacterium Escherichia coli. Journal of bacteriology, 1947. 53(6): p. 673. 2、接合作用的机制： （1）F因子概述 （2）四种不同细胞形式的F因子 （3）三种不同的“雄性”F因子与“雌性”F因子杂交介导的 接合过程 1.F质粒 接合作用由一种被称为F因子（fertility factor）的质粒介导。 （1）大肠杆菌F因子： （a）分子量约为5×107，与转移有关的基因（tra）占了整个图谱的1/3，包括编码性菌毛、稳定接合配对、转移的起始（oriT）和调节等20多个基因。 (a) 特征： （b）既可以脱离染色体在细胞内独立存在，也可以插入（整合）到染色体上。又可以称为附加体（episome）. （c）含有“雄性”F因子的细胞有性菌毛 “雄性”菌株：F+ “雌性”菌株：F- （2）F因子的四种细胞形式： “雄性”菌株 (a) F+： 染色体DNA F因子 独立存在，有性菌毛 (b) Hfr： 染色体DNA 完全整合的F因子 F因子完全插入染色体，有性菌毛 (c) F’： 染色体DNA 携带染色体DNA的F因子 Hfr的F因子脱离染色体DNA时不正常切割，携带一小段染色体基因的F因子，有性菌毛 “雌性”菌株：F-： 无F因子，无性菌毛 染色体DNA （3）三种不同“雄性”F因子介导的接合过程 杂交的结果：供体细胞和受体细胞均成为F+细胞 F+菌株的F因子向F-细胞转移，但是含F因子的宿主细胞的染色体DNA一般不被转移 ① F+×F-杂交 ② Hfr×F-杂交： Hfr (high frequence recombination)：高频重组菌株 染色体上越靠近F因子的先导区的基因，进入的机会就越多，在F－中出现重组子的时间就越早，频率也越高。 ② Hfr×F-杂交： 杂交结果：Hfr×F-杂交后的受体细胞（或接合子）大多数仍 然是F-。 ③ F’×F-杂交： 杂交结果：形成一种部分二倍体，受体细胞变成F’ 部分二倍体（partical diploid）：既带有自身完整的基因组，又有外源DNA片段的细胞或病毒。 单独存在不能发生质粒接合性传递 a）组成 耐药性传递因子 （resistance transfer factor，RTF） 耐药决定子 （resistance determinant, r-det） 存在方式： RTF r-det RTF+r RTF:编码性菌毛和转移质粒 r-det：编码耐药性 b）功能 2. R质粒 转导（Transduction）是以噬菌体为媒介，将供体菌的遗传物质转移入受体菌，通过交换重组而使受体菌获得供体菌的部分遗传性状的过程。 能将一个细菌宿主的部分染色体和质粒DNA带到另一个细菌的噬菌体： 转导噬菌体 细菌转导的两种类型 普遍性转导 局限性转导 通过转导而获得新遗传性状的受体菌叫转导子。 （二）转导 1、普遍性转导（generalized transduction） 毒性噬菌体和温和噬菌体都可以介导普遍性转导，转导过程中，噬菌体可以转导供体染色体的任何部分到受体细胞中 转导模型 普遍性转导的三种后果： 外源DNA被降解，转导失败 进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组交换而形成稳定的转化子 流产转导 完全转导 2、局限性转导（specialized transduction） 温和噬菌体介导，当前噬菌体从宿主染色体上脱离时发生偏差，把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中。 局限性转导过程： 温和噬菌体?裂解时的不正常切割：包含gal或bio基因（几率一般仅有10-6） 形成的杂合DNA能够像正常的?DNA分子一样进行复制、包装，提供