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食管癌组织中PTEN表达及意义 　　[摘要]目的：探讨抑癌基因PTEN在食管癌组织中的表达及其与食管癌发生、发展和临床病理特征之间的关系。方法：应用免疫组织化学S-P法检测PTEN基因在60例食管癌组织、20例癌旁组织及10例正常组织的表达情况。结果：PTEN基因在食管癌组织、癌旁组织、正常组织中的阳性表达率分别为48.3%，90%，100%，差异显著(P 　　[关键词]PTEN基因；食管癌；免疫组织化学 　　[中图分类号]R735 [文献标识码]B[文章编号]1673-7210（2007）10（a）-084-02 　　 　　PTEN是Steck在1997年发现并命名的具有磷酸酯酶活性的抑癌基因,对细胞增殖和细胞周期起调控作用，PTEN失活则促进肿瘤进行性生长和肿瘤细胞增殖活性增加[1]。我们应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（S-P）法检测食管癌PTEN的表达，探讨PTEN与食管癌发生发展之间的关系。现报道如下: 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1标本及临床病理资料 　　收集2002～2005年郑州大学第一附属医院外科手术切除的食管癌标本60例,癌旁食管组织20例，正常食管组织10例。食管癌标本中男36例,女24例；低分化19例, 中分化25例, 高分化16例。TNM病理分期: Ⅰ期18例,Ⅱ期23例, Ⅲ期12例, Ⅳ期7例。淋巴结转移20例。全部标本均经病理诊断证实。所有食管癌患者术前均未接受过化疗或放疗。 　　1.2方法 　　将石蜡标本重新包埋，4 μm厚度连续切片。常规脱蜡、水化、微波恢复抗原，二甲基羟苯胺(DAB)显色，采用免疫组化法检测PTEN在三种组织中的表达情况。鼠抗人PTEN单克隆抗体、S－P试剂盒及DAB显色剂均购自北京中山生物技术有限公司。免疫组化染色程序严格按照试剂盒说明书进行操作，以正常食管鳞状上皮细胞的棕黄着色为阳性对照，用PBS液（0.01 mol/L，pH7.4）代替一抗作阴性对照。 　　1.3检测及判定方法 　　免疫组化采用S-P法。用正常的羊血清代替一抗作为阴性对照，用已知的阳性切片为阳性对照。标本常规脱蜡水化后，置0.01 mol/L枸橼酸缓冲液,微波抗原修复，室温下冷却。按S-P试剂盒说明书操作，DAB显色，苏木素复染，用已知的阳性片和PBS分别作阳性和阴性对照。 　　1.4统计学处理 　　采用SPSS1010软件进行相关数据的χ2检验。 　　 　　2 结果 　　 　　2.1三种组织中PTEN基因的表达 　　食管癌、癌旁组织及正常组织中PTEN蛋白阳性率分别为48.3.0%、90.0%和100.0%,差异有显著性(P0.05)。结果见表2。 　　 　　3 讨论 　　 　　PTEN基因作为一种新型肿瘤抑制基因自1997年3月发现以来，备受关注。其在维持细胞的增殖、分化和凋亡调控中起重要作用，并可能参与调控细胞生长，肿瘤浸润、转移和血管形成[1，2]。PTEN第5个外显子的122～132位氨基酸与酪氨酸磷酸酯酶或丝/苏氨酸、酪氨酸双特异磷酸酯酶的催化中心同源序列一致，被认为是肿瘤抑制基因。它所编码的磷酸酯酶通过阻断磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路，使局灶性粘着斑激酶去磷酸化，下调Ras介导的丝裂酶原激活蛋白激酶活化而对细胞的周期调控有影响，并对细胞增殖、浸润和迁移等多方面起调控作用[3]。PTEN蛋白与酪氨酸磷酸酯酶有相同的功能区，研究人员推测其为一种肿瘤抑制基因[2，4]。 　　我国是食管癌高发区，特别是河南省林县地区。通过对PTEN基因蛋白表达及功能的研究，可以更深入地认识PTEN在肿瘤细胞生长与分化中的作用，为食管癌的早期诊断、临床治疗及预后判断等探寻新的思路和策略。 　　本实验结果显示，癌旁食管上皮细胞中PTEN蛋白表达率（90.0％）和正常食管上皮组织PTEN蛋白表达率（100％）明显高于癌组织中的表达率（48.3％）提示正常食管上皮细胞中可能存在着PIP3-PKB信号传导途径。PTEN的正常表达调控着食管上皮细胞的代谢和分化。食管癌组织中由于PTEN表达异常，丧失对PIP3-PKB信号传导途径的负调控，使食管上皮细胞失去正常的细胞周期调节而过度增殖，进而发生恶变。 　　本实验还分析了PTEN的表达与食管癌临床病理的关系。食管上皮组织PTEN蛋白的表达率从正常鳞状上皮到高分化癌、中分化癌和低分化癌逐渐降低，未侵及浆膜组中PTEN的阳性表达（87.2％）高于侵及浆膜组（52.4％），无淋巴结转移组的阳性率（72.5％）亦高于有淋巴结转移组（40.0％），以上结果表明PTEN的阳性表达与肿瘤的恶性程度，转移潜能呈负相关，提示PTEN基因在诱导肿瘤细胞分化过程中起到重要作用。 　　 　　[参考文献]