EtNBSe联合光动力疗法对成纤维细胞增殖及TGF-β1分泌影响.docVIP

EtNBSe联合光动力疗法对成纤维细胞增殖及TGF-β1分泌影响 　　【摘要】目的：观察EtNBSe(5-ethylamino-9-diethylamino benzo[a]phenoselenazinium chloride)联合光动力疗法(photodynamic therapy，PDT)对人包皮成纤维细胞体外增殖及分泌表型的影响。方法：成纤维细胞接种至培养板，采用不同浓度的EtNBSe处理细胞2 h后，给予同一时间剂量的红光辐照，MTT法检测细胞的功能；酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1) 水平的变化。结果：(1)与空白组比较，细胞接受EtNBSe-PDT处理后，EtNBSe(60、120 pM)组有增殖活性(P 　　【关键词】EtNBSe；红光；光老化；成纤维细胞；光动力疗法 　　 　　The of Influence EtNBSe Together with Photodynamic Therapy on the Fibroblast Proliferation and TGF-β1 Secretion/GAO Feng，HUANG Jin-hua，LU Jian-yun，et al.//Medical Innovation of China，2010，9(10)：006-008 　　【Abstract】Objective：To investigate the influences of 5-ethylamino-9-diethylamino benzo[a]phenoselenazinium chloride (EtNBSe) together with Photodynamic Therapy on human foreskin fibroblast cells proliferation in vitro and secretion phenotype.Methods：Inoculate fibroblasts to the culture plates， treated with different concentrations of EtNBSe， and given the same time red light exposure 2 hours after treatment. Using MTT assay examine the cell functions， and ELISA assay examine the changes of TGF-β1.Results：Compared with the control group， EtNBSe-PDT treated cells especially EtNBSe(60 or 120pM) group proliferated obviously(P 　　1.2.4酶联免疫吸附法(ELISA)测定TGF-β1的含量消化处于对数生长期的细胞，以2×105个/孔的密度接种到24孔板中，每孔1 ml，每组设3个复孔，细胞长满80%~85%时，更换为含1%胎牛血清的高糖DMEM培养液，将细胞同步化处理24 h后，除空白孔，其余每孔加入梯度EtNBSe(0、60、120 pM)，预处理2 h后以红光进行照射，照射后更换培养基，48 h收集各组培养上清液，使用TGF-β1试剂盒，用双抗体夹心法测定细胞培养上清液中TGF-β1的含量，依次按说明书进行操作，绘制标准曲线，根据标准曲线计算出样本的浓度。 　　1.3统计学处理以SPSS 13.0统计软件对实验数据进行统计学分析，计量资料以(x±s)表示，采取t检验，P0.05)。见图1。 　　 　　图1梯度红光照射对细胞的影响 　　2.2梯???浓度EtNBSe联合红光光动力疗法对成纤维细胞的影响为检测和摸索实验中，合适的EtNBSe浓度，采用梯度EtNBSe处理组和梯度EtNBSe+红光照射组处理成纤维细胞，24 h后MTT法检测细胞功能。 　　 　　图2EtNBSe处理不同时间后光对红胞的影响 　　与对照组比较，梯度EtNBSe处理组对细胞不产生明显的细胞毒反应及细胞增殖活性(P0.05)。图2可见，梯度EtNBSe+红光照射组，在梯度EtNBSe处理1 h后照光，与对照组比较，对细胞不产生明显的细胞毒反应及细胞增殖(P0.05)；在梯度EtNBSe处理2 h后照光，EtNBSe(30、60、120 pM)对成纤维细胞有增殖活性，以EtNBSe(60、120 pM)增殖活性最明显，与对照组比较，差异有统计学意义(P 　　[3] 鲁建云，于小峰