高浓度葡萄糖对鲍曼不动杆菌生物膜形成能力影响-effect of high concentration glucose on biofilm formation ability of acinetobacter baumannii.docxVIP

菌为对照组。将阴性对照的平均A570值加标准差定义为Ac,用待测菌株3个复孔（A570）的平均值与Ac比较,则菌株生物膜形成能力可以分为四类:阴性(-):无生物膜形成,A≤Ac;弱阳性(+):AcA≤2×Ac;中等阳性(++):2×AcA≤4×Ac;强阳性(+++):A4×Ac。采用以上标准得出结果显示，该30株鲍曼不动杆菌临床分离株均具有生物被膜形成能力且形成试验均为强阳性。利用琼脂倍比稀释法测定氨曲南注射液、头孢他啶注射液、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦、左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南、阿米卡星对鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果显示30株鲍曼不动杆菌临床分离株对头孢他啶、哌拉西林、阿米卡星的耐药率均为96.6%（29/30），头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南的耐药率均为86.7%(26/30)，哌拉西林/舒巴坦、左氧氟沙星的耐药率分别为93.9%（28/30）、63.6%(19/30)。因此，该30株鲍曼不动杆菌均具有较强的生物膜形成能力，且具有多重耐药性。二、高浓度葡萄糖对鲍曼不动杆菌生物膜形成能力的影响首先对30株鲍曼不动杆菌的标本分布进行统计，发现多数以老年患者居多（36.7%），标本类型主要为痰标本（76.7%），患者所在科室主要集中在神经外科（36.7%）、骨科（13.3%）、ICU（13.3%）和SICU（10%）等。对上述30株生物膜形成能力为强阳性的鲍曼不动杆菌用不同浓度葡萄糖（5、7、11.1、16.7、20、30mmol/l）培养，同样采用结晶紫染色法对其形成的生物膜进行半定量检测。半定量实验数据经统计分析显示，随着葡萄糖浓度的增加，其吸光度呈上升趋势，在11.1mmol/L以后形成的生物膜要比不加糖条件下形成的生物膜多（p0.05），并且在葡萄糖浓度为11.1mmol/l之后各组吸光度值无差异（p0.05），呈平缓趋势。这说明高浓度葡萄糖能明显诱导鲍曼不动杆菌生物膜的形成。三、激光共聚焦显微镜观察高浓度葡萄糖对鲍曼不动杆菌生物膜形成的影响从30株鲍曼不动杆菌中挑选出生物膜形成能力最强的三株鲍曼不动杆菌为研究对象，采用不同浓度葡萄糖培养，在盖玻片上形成生物膜，分别于接种后12、24、36、48、60和72h取出玻片，采用免疫荧光技术标记细菌和多糖，激光扫描共聚焦显微镜（CLSM）观察鲍曼不动杆菌生物膜形成的动态过程，并测定其生物膜的厚度。用CLSM观察显示，当葡萄糖浓度≥11.1mmol/L时，鲍曼不动杆菌形成成熟生物膜的时间缩短了，在24h左右便可形成成熟的生物膜，比不加糖组要提前24h；生物膜厚度的数据经统计分析得出，各个加糖组的厚度的最大值都落在12~36h范围内，并且各加糖组的厚度最大值均比不加糖组的最大值大（p0.05）。这表明，高浓度葡萄糖不仅能明显诱导鲍曼不动杆菌生物膜的形成，并且会缩短其生物膜形成周期。【关键词】鲍曼不动杆菌；生物膜；耐药性；葡萄糖；激光扫描共聚焦显微镜；免疫荧光技术；结晶紫法HighConcentrationGlucoseonAcinetobacterbaumanniibiofilmformationabilityAbstractAcinetobacterbaumanniiisanon-fermentingGram-negativebacteriawidelyfoundinnatureandinthehospitalenvironment,pathogensbelongsconditions,cancausearangeofnosocomialinfections,suchaspneumonia,urinarytractinfections,sepsissecondarytomeningitis,woundinfection,aseriousthreattothelivesofpatients.Inrecentyears,withthebroad-spectrumantibiotics,inparticular,theincreasedresistancetocarbapenemswiderangeofapplicationsaswellasmedicalimplants,Acinetobacterseriousnosocomialinfectionscausedbythebacillusincreasinglyseriousinfection,morbidityandmortalityincreasedrapidly.Alongtime,thebacteriamainlybyindividualplanktonicbacteria,however,recentstudiesshowthatthebacteriamainlythroughtheformofabi