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两种乙型肝炎血清标志物检测方法成本-效果分析 　　【摘要】目的:探讨两种方法在乙型肝炎血清学标志物临床检验中的成本-效果。方法:用ELISA检测和Q-PCR检测对乙型肝炎患者进行检测。结果:Q-PCR检测的相对总符合率高于ELISA检测;但是Q-PCR检测的成本费用远高于ELISA检测;经过比较,ELISA检测的成本效果值低于Q-PCR检测。结论:虽然Q-PCR检测的灵敏度比常规ELISA检测的高,但是其成本高,成本-效果比明显高于ELISA检测,不适应临床大规模推广。 　　【关键词】乙型肝炎血清学标志;成本-效果分析;Q-PCR检测;ELISA检测 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】1006-1959(2009)10-0232-01 　　 　　1 资料与方法 　　 　　1.1 资料来源:选择2007年10月～2009年2月乙型肝炎患者160例,年龄3月～84岁,平均年龄39.5岁;其中男100例,女60例。所有患者都采用了ELISA检测和Q-PCR检测。 　　1.2 检测方法 　　1.2.1 ELISA检测:ELISA使标记抗原和抗原与限量抗体发生竞争性结合,反应平衡后,加入分离剂,使游离抗原与抗原抗体复合物分离,测定沉淀中放射性强度;加入标本后,再用酶标记的抗原或抗体测定抗体或抗原,使底物显色。所有标本均当天用ELISA法测定,仪器为罗氏ELECSYS2010全自动免疫电化学发光分析仪。试剂为罗氏公司所提供的乙肝两对半相配套试剂,严格按仪器操作规程及试剂说明书操作。 　　1.2.2 Q-PCR检测:Q-PCR原理是以PCR方式进行体外扩增,利用Tag酶的5-3外切酶核酸活性,在普通引物中添加一条标记了荧光基团的荧光双标记探针,即5端和3分别标记上荧光报告基团(R)和荧光淬灭基团(Q)。当这条探针保持完整时,R基团的荧光信号被Q基团抑制,一旦探针被切断,抑制作用消失,R基团的荧光信号就可以被检测到。在本组检测中,试剂盒由中山医科大学达安基因诊断中心生产,用裂解液提取DNA模板总反应体系为20ta,扩增片段为314bp。各反应管置入5700自动荧光检测仪中,按93℃2min预变性,93℃30s、55℃30s,72℃1min进行40个循环,结果荧光定量PCR由电脑自动计算DNA含量。 　　1.3 统计指标:总符合率=(真阴性数+真阳性数)/(真阴性数+假阴性数+真阳性数+假阳性数)×100%。 　　1.4 成本确定:成本是指人们所关注的某一特定方案或药物治疗所消耗的资源价值,用货币单价表示,包括直接成本、间接成本和隐形成本。直接成本包括药费、给药费用、检查费、住院费等。间接成本包括因疾病导致患者及其家庭的经济损失。本文只统计每组患者整个治疗过程的直接检测成本。ELISA检测一次的平均成本为125.9元,Q-PCR检测一次的平均成本为325.6元。 　　 　　2 结果 　　 　　2.1 总符合率:2项检测指标中,Q-PCR检测的相对总符合率高于ELISA检测,具体情况见表1。 　　 　　2.2 成本效果分析:成本-效果分析(CEA)是较为完备的经济评价形式之一,其目的在于寻找达到某一治疗效果最低的治疗方案。成本效果比(C/E)则把两者有机地联系起来,它是采用成本与效果的比值表示1份效果所需要的净成本,比值越小越好。2种治疗方案的成本-效果分析结果见表2,ELISA检测的成本效果值低于Q-PCR检测。 　　 　　3 讨论 　　 　　当前检测乙型肝炎病毒(HBV)主要依靠血清学方法,目前常用的检测方法有:免疫扩散、对流免疫电泳(CIEP)、补体结合(CF)、间接血凝(PHA)、反向间接血凝(RPHA)、免疫粘附血凝(IAHA)、免疫电镜(IEM)、免疫荧光、酶免疫(EIA)等。最敏感和特异的方法是EIA和RIA。但是在免疫测定是基于抗原和抗体反应来检测标本中的微量物质的方法。抗原和抗体结合形成的复合物,随着抗原量的增加而逐渐增加。但达到峰值后,沉淀量随着抗原量的进一步增加反而减少。这是因为在ELISA测定中,过量的抗原分别和固相抗体及酶标本抗体结合,而不再形成夹心复合物,这很容易被洗掉(类同于沉淀反应中抗原过剩的“后带现象”故临床中HAV诊断指标以S/CO值报告时,显色的吸光值所得结果低于实际含量,甚至可不显色而出现假阴性结果时,就不能完全客观地反映HBV的含量。近年来,随着分子生物学技术迅速发展。分子生物学的理论和方法使我们可以深入地了解微生物的某些基因的组成、功能以及转移规律等,从而使微生物的基因型特征或基因标志对微生物进行检测及鉴定成为可能。Q-PCR技术作为一种新技术,具有快速、准确、灵敏等优点,又能同时平行检测大量样本。由于实验时间长,制备的成本高,制作过