新型磁性分子印迹纳米复合系统用于生物大分子识别的研究.pdf

中文摘要 中文摘要 蛋白质印迹是制备对模板蛋白具有特异选择性功能的分子印迹技术。因受 蛋白质性能的限制，进展相对缓慢，技术尚不成熟，仍需要改进常规的制备和 分析方法来适应蛋白质的物理性质(如大小，相容性、构象灵活性、水溶性)， 以提高其稳定性，选择性，位点可接近性，和降低成本效率等。 本工作结合磁性分离速度快和分子印迹技术的预定选择性的优点，以及纳 米结构材料比表面积大传质速度快的优势，采用表面印迹技术首次合成了四种 新型的平均粒径100-400am核一壳型的磁性分子印迹纳米复合体系，并用于 生物大分子的分离识别研究。四种新型的磁性分子印迹纳米复合体系包括：① 识别牛血红蛋白的核一壳型磁性分子印迹聚合物纳米粒子，即采用溶胶一凝胶 法制备二氧化硅包覆壳的磁性四氧化三铁纳米粒子，以间氨基苯硼酸作为功能 单体和交联剂，通过过硫酸铵氧化，在二氧化硅修饰的四氧化三铁表面形成聚 间氨基苯硼酸分子印迹聚合物薄层；②新型牺牲共价键合牛血红蛋白超顺磁性 纳米印迹聚合物，即以共沉淀法合成的Fe304磁性纳米粒子为载体，将其表面硅 烷化修饰氨基基团，利用戊二醛双醛基的特性将其修饰到磁性纳米粒子表面， 而另一端醛基与蛋白质上的氨基基团以亚胺共价键键合，再利用间氨基苯硼酸 进行聚合，合成表面印迹有蛋白质分子的核一壳型超顺磁性纳米聚合物纳米球： ③新型磁性牛血红蛋白表面印迹聚苯乙烯纳米粒子，即在包覆二氧化硅壳的磁 性四氧化三铁纳米粒子的表面通过硅烷化试剂接枝聚合聚苯乙烯，通过表面印 迹技术合成出较大粒径的特殊表面形态的超顺磁性表面印迹聚苯乙烯纳米粒 子；④超顺磁性的高分散性聚苯乙烯，即用油酸和十二烷基苯磺酸钠为双层表 面活性剂表面修饰Fe304磁性纳米粒子，制成稳定的水分散性纳米Fe304可聚合 磁流体，在Fe304磁流体存在下，将苯乙烯与甲基丙烯酸通过乳液聚合方法制备 了磁性高分子纳米球，再使用间氨基苯硼酸对其进行表面印迹。 通过透射电子显微镜、X射线衍射、热重分析、振动样品磁强计研究了分子 印迹磁性纳米材料的形态、吸附、识别性能，探讨了分子印迹聚合物对模板蛋 白的识别机理。吸附结果表明聚间氨基苯硼酸包覆分子印迹聚合物的磁性纳米 粒子对模板蛋白质具有高吸附能力和相对低的非特异吸附。这些印迹磁性纳米 粒子克服了整体印迹材料阻碍蛋白质分子扩散的缺点，壳层上具有特异识别位 I 中文摘要 点的分子印迹纳米粒子对模板蛋白质有特殊的选择性和高稳定性，并且能够使 蛋白质分子在较短时间内达到扩散吸附平衡，并可在夕t-／Jrl磁场下实现快速磁性 分离。这些结果证明表面为印迹聚合物修饰的超顺磁性分子印迹纳米复合物在 化学和生化分离、细胞筛选、生物传感器、药物传输等领域中具有很好的应用 前景，并能够实现蛋白质组学中高丰度蛋白质的去除和低丰度蛋白质的富集。 基于上述，本工作结合磁性纳米技术、分子印迹技术、电磁学、分析化学 等诸多领域的优势，为研究新型多功能性分子印迹聚合物提供了新的研究思路， 并对磁性分子印迹纳米粒子在蛋白质分离和富集的应用作了初步探讨。 关键词磁性纳米粒子 蛋白质分子印迹聚间氨基苯硼酸薄层选择性吸附 II Abstract Abstract Proteinmolecular isall effective forthecreationof imprinting technique specific sitesfor ina network．Ithas limited recognitiontemplateproteinpolymer only SUCCESSandits hasbeenslowduetosomeinherentlimitationsof progress protein