生物条形码信号放大技术检测食源性致病菌DNA的研讨.pdfVIP

摘要 本论文利用生物条形码放大技术，在原有技术基础上加以改进，通过构建基于生物条形码放 大技术的DNA非标记电化学检测方法，实现对大肠杆菌DNA、沙门氏菌DNA和志贺氏菌DNA 这三种食源性致病菌同时准确有效检测。主要内容如下： Gds．DNA)四种类型DNA的电化学行为进行了比较研究；为了提高电极响应信号及检测灵敏度， 采取电沉积技术制备了纳米金阵列电极：通过简单有效的方法实现对目标DNA的检测，同时实 现对碱基类型有显著差异的不同类型DNA的识别。 (2)依据文献及有关数据库，确定大肠杆菌特征基因序列及目标DNA分子，并设计了目标DNA 探针，同时通过专业软件进行模拟汁算，验证所设计的DNA探针是否符合实验要求；利用DNA 生物条形码和纳米金联级信号放大作用检测了大肠杆菌DNA，同时对传统检测方法进行改进，构 建了基于DNA生物条形码的两步法检测目标DNA的新方法。 (3)在前期T作基础上，通过含阅文献和专业数据库确定沙门氏菌、志贺氏菌两种食源性致病 菌的特征基冈序列及目标DNA分了，设计目标DNA探针，并进行模拟计算，验证所设计的DNA 探钊‘是台符合实验要求。建立了一种基于DNA生物条形码放大技术的非标记直接电化学检测方 法，实现了埘大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等多种食源性致病菌特征DNA分了的同时检测。 关键词：生物条形码，信号放大技术，DNA检测，食源性致病菌，电化学分析 Abstract constructa andsensitivedetectionmethodforDNAbasedon thesis，We novel，rapid bio．barcode electrochemicalrealizedaccurateandeffectivedetectionof technologyby analysis，and maincontentsareas Escherichiacoli Salmonella DNAatthesametime．The DNA， DNA，Shigella foIlOWS： differenceinelectrochemicalbehaviorbetweenG-richDNAand DNAwere (1)The ordinary inthe onthefour ofDNAintheelectrochemical researchedfirstwork．A comparativestudy types behaviorsuchas anddouble- ordinarysingle-stranded(ss—DNA)，double-strandDNA(ds-DNA)，single strandG—richDNA．A electrodewasmade goldnanoparticlesarray byelectro—depositiontechnique， could whichwasfoundnot could theelectrode also signal，but only efficientlyimproved response the resultindicatethatthismet