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制作优质LCT液基细胞片方法与探讨 　　【摘要】 目的 探讨如何制作优质的LCT液基细胞学片子。方法 对LCT液基细胞学片制作过程中容易出现的问题加以改进。结果 LCT液基片涂片均匀一致，颜色清晰、背景干净、无非特异性染色，节省了病理医生阅片的时间，降低了误诊率，提高工作效率。结论 制作的优质LCT液基细胞片大大提高了宫颈病变的阳性诊断率，值得推广。 　　【关键词】 LCT液基细胞取材;振荡;粘附剂;染色 　　【Abstract】 Objective To discuss the method of manufactures the high quality LCT fluid basal cell study flat and thin piece. Methods The question which easy to appear to the LCT fluid basal cell study piece manufacture process was impraved.ResultsLCT fluid substrate smear even consistent, the color is clear, the background clean, nothing but the specificity dyed, saves pathology doctor to read the piece the time, reduced the error diagnostic rate, raised the working efficiency.Conclusion Make high quality LCT fiuid basal cell can the positive increase diagnosis rate of cervical lesions,it is worthy of clinic application. 　　【Key words】 LCT fluid basal cell selection; Vibration;Adhesion agent; Dyeing 　　液基细胞学检查是采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类筛选及诊断，它是目前国际上较先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，与传统的宫颈刮片巴氏染色检查相比明显提高了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率，宫颈防癌细胞学检查对宫颈癌细胞的检出率为100%，同时还能发现部分癌前病变，微生物感染如霉菌、滴虫、病毒、衣原体等。液基技术是应用于妇女宫颈癌筛查的一项先进的技术。那么怎样才能制作出一张优质的液基细胞学片呢？制作优质LCT液基细胞片跟临床医生取材、固定、技术员的制片及染色密切相关，每一步都要求严格操作。 　　1 材料与仪器 　　取材毛刷、液基细胞保存瓶、载玻片、细胞粘附剂、离心管、离心机、转移器、真空泵、微型旋涡混合仪、染色架、染色槽、100%酒精、PBS缓冲液、苏木素染液、EA/OG染液、二甲苯、盖玻片、中性树胶。 　　2 方法 　　作者将制作优质LCT液基细胞片阐述如下。①临床医生取材，要求使用一次性宫颈取样刷，取材时把毛刷中间较长的部分插入宫颈管，外侧毛刷抵住宫颈外口，力度适中的推向宫颈，并按顺时针方向3～5圈，取出刷头全部放入细胞保存液;②收集标本、振荡标本瓶30 s;③于干净的玻璃片上涂上细胞粘附剂、自然干燥或37度恒温箱干燥;④于离心管上加入4 ml的细胞分离提取液;⑤用注射转移器吸取标本瓶内标本置加有分离提取液的离心管上；⑥离心1107转、离心力200 g、2 min;⑦用真空泵、把离心管上的上清液慢慢吸走;⑧离心2214转、离心力800 g、10 min;⑨弃上清液，把离心管放在微型旋涡混合仪转动不同方向振荡，静止10 min;⑩于此离心管上加入400～600 ml的PBS缓冲液;［11］染色架上放上涂有细胞粘附剂的玻片，放上染色槽，吸取400 ml的标本液于染色槽内;［12］静上5 min，倒掉染色槽内的标本;［13］加入100%酒精于染色槽内固定1 min、倾倒，加入PBS缓冲液于染色槽内2次各1 min、倾倒；［14］加入苏木素染色剂2 min倾倒；［15］加入100%酒精2次各1 min、倾倒；［16］加入PBS缓冲液于染色槽内2次各1 min、倾倒；［17］加入EA/OG染色剂6 min倾倒；［18］加入100%酒精3次各1 min倾倒；［19］御下染色槽把玻片放入装在玻片架上于100%酒精脱水、二甲苯透明；［20］中性树胶封片。 　　2 结果 　　液基细胞片涂片薄、均匀一致，颜色清晰，背景干净，有效诊断细胞充足，从而提高了涂片阳性检出率，且制片后保存时间长。 　　3 讨论