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长效奥曲肽影响大鼠肝纤维化形成研究 　　(1．上海交通大学医学院附属第三人民医院消化内科，上海201900；2．上海交通大学医学院附属新华医院消化内科，上海201900) 　　摘要：目的：观察和探讨长效奥曲肽对四氯化碳(CCl4)诱发的大鼠肝纤维化的影响及机制。方法：SD大鼠40只，随机分为正常对照组(n=8)、肝纤维化组(n=16)、长效奥曲肽组(n=16)。通过40％CCk皮下注射(3ml/kg)诱导建立大鼠肝纤维化模型，长效奥曲肽组同时给与长效奥曲肽(善龙，0.8m/kg)肌肉注射，每28天给药1次。8周后观察大鼠肝脏大体形态、肝脏重量，体重比和组织学改变；用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)含量。结果：正常对照组大鼠肝脏大体形态和组织学无异常改变。肝纤维化组及长效奥曲肽组大鼠肝脏质地变硬，表面明显结节，组织学见肝细胞脂肪变性、坏死、纤维组织增生，假小叶形成等，但后者组织学损害显著轻于前者(P＜0.05)。肝纤维化组及长效奥曲肽组肝脏重量，体重比均明显高于正常对照组(P＜0.01)，但长效奥曲肽组低于肝纤维化组(P4，上海化学制剂厂，化学纯)，用橄榄油配制成浓度为40％；血清HA、PⅢNP试剂盒(上海森雄科技实业有限公司)等。 　　 　　1．2实验方法 　　SD大鼠称重并标记后，根据SAS软件随机分组数据分为正常对照(n=8)、肝纤维化(n=16)和长效奥曲肽(n=16)3组。肝纤维化组每周2次皮下注射40％CCl4ml/kg，首剂皮下注射5ml/kg：每4周肌肉注射生理盐水1次：长效奥曲肽组每周2次皮下注射40％CCl43ml/kg(首剂5ml/kg)，同时每4周给予长效奥曲肽肌肉注射1次(0.8 mg/kg)；正常对照组仅给以橄榄油和生理盐水，注射方法及剂量与上述2组相同。 　　3组大鼠均于8周后经腹腔注射3％戊巴比妥钠(2ml/kg)麻醉后开腹，腹主动脉采集血液。用ELLISA法检测血清HA、PⅢNP；同时采集肝脏组织标本，以10％福尔马林固定、脱水、常规石蜡包埋，连续切片行HE染色和Masson三色染色并参照有关标准进行纤维化程度评定。 　　 　　1．3统计学方法 　　各组测定值计量数据用均数(x)±标准差(s)表示，组间比较采用t检验；计数资料组间比较采用卡方(x2)检验。检验水准α=0.05；当P＜0.05时，认为组间差异具有统计学意义?? 　　 　　2．结果 　　 　　2．1大鼠肝脏重量／体重比 　　正常对照组大鼠毛色光亮。食欲好。反应灵活。肝纤维化组及长效奥曲肽组(长效奥曲肽组第7周死亡1只，因注射CCl4时大鼠逃窜误抓导致死亡)大鼠毛色灰暗，稀疏，反应迟钝，食欲减退，在给药4周后体重增长明显低于正常对照组，但8周后长效奥曲肽组大鼠体重显著高于肝纤维化组(P＜0.01)。8周后肝纤维化组及长效奥曲肽组肝脏重量／／$重比均明显高于正常对照组，但长效奥曲肽组低于肝纤维化组(P＜0.05)。 　　 　　2．2肝脏大体形态和病理组织学观察 　　正常对照组大鼠肝脏组织切片HE染色和Masson染色见肝脏小叶结构正常，未见脂肪变性、坏死和纤维组织增生。肝纤维化组大鼠8周后的肝脏质地变硬，边缘变钝，表面呈明显结节状。肝脏切片HE和Masson染色可见肝细胞脂肪变性、坏死，纤维组织增生。长效奥曲肽组肝脏质地变硬，边缘变钝，表面呈明显结节状，肝脏组织切片HE和Masson染色可见肝脏细胞脂肪变性、坏死，纤维组织增生。但与肝纤维化组比较肝脏细胞脂肪变性、坏死数量减少(P＜0.05)，纤维组织增生减轻(P＜0.05) 　　 　　2．3血清肝纤维化指标变化 　　正常对照组大鼠血清HA、PⅢNP含量分别为(18.5±3.8)ng/ml，(8.2±3.4)ng/ml。肝纤维化组大鼠血清HA、PⅢNP含量分别为(179.3+33.5)ng/ml，(59.6±15.6)ng/ml，高于正常对照组(P＜0.01)。长效奥曲肽组大鼠血清HA、PⅢNP含量分别为(152.4+36.1)ng/ml，(41.2＋13.4)ng/ml，高于正常对照组(P＜0.01)，但低于肝纤维化组(HAP＜0.05；PⅢNPP＜0.01) 　　 　　3．讨论 　　 　　肝纤维化形成目前公认为是由于各种原因导致肝星状细胞(Hepatic Stellate Cell，HSC)被活化后，大量细胞外基质(Extracellulamatrix，ECM)合成和沉积，胶原纤维组织增生，最终导致肝纤维化。如何减少和抑制HSC的激活是抗肝纤维化的研究热点。长效奥曲肽是一种人工合成的天然生长抑素的八肽衍生物，且前主要用于某些恶性肿瘤的治疗。但是。它保留了与生长抑素相同的药理作用，且作用