免疫组化在病理诊断中的应用课件.ppt

免疫组化在病理诊断中的应用 北京友谊医院病理科 柳玮华 免疫组化介绍 免疫组化原理 Enlivision染色方法 免疫组化的使用范围 各系统肿瘤的抗体表达 免疫组化的原理 根据抗原和抗体特异性反应的免疫学原理，应用标记抗体检测组织中未知抗原的方法。 抗原+抗体（标记）→抗原抗体复合物 通过抗原和抗体的特异性结合检测组织中的化学成分（蛋白—抗原） 显示系统：抗原抗体复合物+检测系统 将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体（即EnVision） Enlivision染色方法 (1)、将切片捞至APES胶片上，放入60℃温箱中烘烤1小时。 (2)、经二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水后流水冲洗。 (3)、过3 ％H2O2中20min后流水冲洗。 (4)、修复高火3min后，低火15min后，自然冷却至室温。 (5)、取出玻片放至湿盒，PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加1滴或 50μl的第一抗体40min。 (6)、PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的聚合物增强剂(试剂A），室温孵育20min。 (7)、PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的酶标鼠/兔聚合物(试剂B），室温下孵育30min。 (8)、PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加2滴或100μl