第一部分核酸的制备分离纯化.pptxVIP

核酸的制备（分离、纯化）一、总论二、以质粒DNA为例谈DNA的分离纯化三、以真核生物为代表介绍总RNA的纯化四、核酸的进一步纯化（聚乙二醇、氯化铯梯度离心问题：分离核酸的基本依据、方法？核酸分离主要需要注意的是什么？DNA和RNA分离时的主要差别？不同的生物体中，核酸所处的环境不尽相同：1、核酸与蛋白质结合紧密程度不同。2、DNA与RNA含量有差别。3、核酸分子量大小有差别。4、…..由于核酸性质基本相同，生物体所组成的成分基本相同，因此，对于不同的生物体核酸的分离方法相差不大。以上是常见核苷酸结构，中性PH下的离子状态的钠盐形式。结构决定性质，性质是分离的基础。核酸的结构特点：分子巨大，有共扼双键、氢键、苷键、和磷酸二酯键，自由氨基、磷酸基。核酸的二级结构：DNA双螺旋结构；RNA大多为单链，链的许多区域或自身发生回折，回折区内的多核苷酸段呈螺旋结构。核酸性质—核酸性质与其结构和组分是密切相关的分子量大小：RNA和DNA的分子量都很大。RNA分子量104-106 或者更大。DNA分子量1.6×106-2.2 × 109 。性状和溶解度：DNA多为白色纤维状固体。RNA为白色粉末。都微溶于水，他们的钠盐在水中溶解度较大，都溶于2-甲氧乙醇，但不溶于一般有机溶剂（如：乙醇、乙醚、氯仿、戊醇和三氯醋酸等）。吸收光谱：具有共扼双键的嘌呤和嘧啶，故皆具有独特的紫外吸收光谱。核酸在240-2