第9节 色谱法基础.ppt

第九章 色谱法基础 一、色谱法概述 A.J. P. MARTIN 和R.L.M. Synge 色谱法的发展历史 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作 二、色谱法分类 第九章 色谱法基础 第九章 色谱法基础 分配系数 K 的讨论 2.分配比 k 3. 容量因子与分配系数的关系 例：已知一根长1m的色谱柱的n有效为1600块，组分A在该柱上的调整保留时间为100s，试求A峰的半峰宽及有效塔板高度。 塔板理论的特点和不足 1. 涡流扩散项 A（多径项） 减小分子扩散项Ｂ／u 采取措施： ① 适当提高流动相流速u，减小保留时间 ② 用相对分子质量较大的载气作流动相。 Dg∝ B＝2γDg ③ 适当降低柱温Ｔc。 气相色谱 为提高柱效，Ｈ小，应注意以下几点： １）采用适当小而均匀的载体，柱填充应均匀。 ２）固定液液膜薄而均匀，并且不宜流失。 ３）载气流速小的时候，Ｂ／u是影响Ｈ的主要因素，选Ｍr大的载气，如Ｎ２； 载气流速大的时候，Cu是影响Ｈ的主要因素，选Ｍr小的载气，如H2，Ne。 ４）采用适当的柱温。 4.流动相流速与柱效——最佳流速 速率理论的要点 第九章 色谱法基础 分离度的表达式： 例 题 ： 第九章 色谱法基础 2. 定量校正因子 （1）归一化法 （2）外标法 （3）内标法 内标法特点 作业：P188  15、17、21 一、色谱的定性分析 1.利用纯物质定性的方法 通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中的位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。 2.利用相对保留值α定性 α指组分与基准物的t’R的比值，它仅与柱温和固定液性质有关，与其他操作条件无关。因此比保留值定性更方便、可靠。基准物：选取易得到纯品的，而且与被分析组分保留值相近的物质，如：正丁烷、正戊烷、环己烷、苯、对二甲苯、环己醇、环己酮等。 在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。 若未知样品较复杂，可将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。 注意：当进样量很低时，若峰不重合，峰中出现转折，或半峰宽变宽，则一般可肯定试样中不含有与所加已知纯物质相同的化合物。 3.加入已知物增加峰高法 4.保留指数定性法 柯瓦指数（Kovats）指数，用I表示，表示物质在固定液上的保留行为，是目前使用最广泛并被国际公认的定性指标，具有重现性好，标准统一及温度系数小等优点。 测定方法： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。 其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有n和n＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示： t’R(n) t’R(X) t’R(n+1) t t t ) ( ) ( ) ( n R X R n R + 1 100（n+1） Ix 100n lgt’R(n+1) lgt’R(x) lgt’R(n) ) ( ) ( ) ( ) 1 ( lg lg 100 lg lg 100 ) 1 ( 100 + - - = - - + n x R x n R n R R t t n I t t n n 注：同系物组分的ΔI一般为100的整数倍，而除了正构烷烃外，一般其它物质的 I 不等于该化合物的含碳数乘100。 练习：在阿皮松L柱上，柱温100℃时，测得某组分的t’R为310.0mm，正庚烷t’R为174.0mm，正辛烷的t’R为373.4mm，求组分Ix。 与文献值对照，相同色谱柱及100℃柱温下，乙酸正丁酯 I =775.6 5.用经验规律和文献值定性 当没有待测组分纯标准样品时，可用文献值定性，或用气相色谱中的经验规律定性。 （1）碳数规律（同系物） 大量实验证明，一定温度下，同系物的 lgt’R与分子中碳原子数称线性关系，即 （2）沸点规律（同族同碳数异构体化合物） 练习：含n-C10，n-C11，n-C12烷烃混合物，在某色谱条件下流出时n-C10，n-C12的 t’R