恰玛古中氨酸的测定 毕业论文.docVIP

恰玛古中氨基酸的测定 摘要：恰玛古中有人体必有的氨基酸。本文采用了分光光度法来测定伊宁，拜城县，柯坪县，焉耆县的恰玛古中氨基酸含量[1]。 丙氨酸作为标准溶液绘制出标准曲线，其回归方程为: Y=0.01024+1.28961X，R2=0.99831 0.014990.0001 mg/ml的范围内呈良好的线性关系。平均回收率为94.06%。用比色法查出丙氨酸与显色剂显色在570nm处测定吸光度。结果表明：伊宁恰玛古中氨基酸的含量最高，柯坪恰玛古氨基酸的含量最低。 关键词：恰玛古；氨基酸；分光度法；测定 前言 恰玛古(芜菁，Brassica campestris)一种草本是字花科植物，又称蔓箐、狗头芥、鸡毛菜等，维吾尔语称为“恰玛古”(音译)；药食两用，广泛分布在全国各地 [2]。《中国中草药大全》、《本草纲目》、《维吾尔药志》、《中华人民共和国卫生部药品标准、维吾尔药分册》等药典对恰玛古的植物来源、药材性状(包括块、根、叶、花和子)、化学成分、药理作用、功能主治、配方加工等都有详细记载。是肺身之佳品，具有清肺止咳，填精壮阳，明目增视等功效。据《大医典》记在长食恰玛古能“生发乌发，润喉顺气，填精壮肾，软肠通便，通利关节，治斑秃，喉燥气短，肾脏瘦弱，骨节不利等” [4]。 恰玛古是高碱性的植物，能平衡人体酸碱度。构成人体的最基本的物质，有蛋白质、脂类、碳水化合物、无机盐、维生素、水和食物纤维等。 作为构成蛋白质分子的基本单位的氨基酸，无疑是构成人体内最基本物质之一。 构成人体的氨基酸有20多种，它们是：色氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸、赖氨酸、组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯谷氨酸、乌氨酸等。这些氨基酸存在于自然界中，在植物体内都能合成，而人体不能全部合成。茚三酮溶液与氨基酸共热，生成氨。氨与茚三酮和还原性茚三酮反应，最终为蓝色化合物。该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比因此在法可以用茚三酮对氨基酸进行。 1.2.2试剂 1.盐酸（分析纯）2.茚三酮（分析纯）3.乙二醇甲醚（分析纯）4.抗坏血酸（分析纯）5。丙氨酸（分析纯）6.乙醇（分析纯）7.柠檬酸（分析纯）8.氢氧化钠（分析纯）。 1.2.3试剂的配制 1.茚三酮乙二醇甲醚的制备：先制备还原性茚三酮，称去2.5克茚三酮，用65ml沸蒸馏水溶解，的黄色溶液，将5g抗坏血酸用250ml温蒸馏水解一边搅拌一边将抗坏血酸溶液滴加到茚三酮溶液中，不断出现沉淀。滴定后继续搅拌15min，然后在冰箱内冷却到4℃过滤，沉淀用冷水洗条3次。然后称取0.043g茚三酮和0.007g还原茚三酮，用50ml乙二醇甲醚溶解。 2. 1%抗坏血酸溶液的制备：精密称取1克抗坏血酸固体放到100ml的容量瓶中水稀释刻度。 3．4%氢氧化钠溶液的配制：称取氢氧化钠4g放到100ml的容量瓶中水稀释至刻度。 4．pH5的柠檬酸溶液的制备：精密称取2g柠檬酸稀释然后加0.1mol/l氢氧化钠溶液至pH=5[8]。 5．6mol/L盐酸的制备：100容量瓶中放入50ml盐酸再加入50ml水稀释刻度。 6．60%乙醇的制备：量取63ml乙醇放入100ml容量瓶中水稀释至刻度。 7. 丙氨酸的配制：取0.032g丙氨酸放入100ml容量瓶中水稀释至刻度。1.3 实验方法 1.3.1 最大吸收波长 精密量取浓度为0.32mg/ml丙氨酸标准溶液0.0ml，0.1ml分别装入25ml具塞试管中，加水使成1.0ml，加pH为5.0的柠檬酸缓冲溶液1.0ml，加1%抗坏血酸溶液0.1ml，茚三酮乙二醇甲醚试液1.0ml，摇均，放到沸水中加热3分钟，取出，放冷至室温，加60%乙醇3ml，水稀释至刻度，摇均。用分光光度计，在460-650nm波长处扫描得吸收曲线，并确定最大吸收峰的波长，以此为测（结果见表-2图-1） 1.3.2标准曲线的绘制 精密量取浓度为0.32mg/ml丙氨酸标准溶液0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7ml分别装入25ml具塞试管中，加水使成1.0ml，加pH为5.0的柠檬酸缓冲溶液1.0ml，加1%抗坏血酸溶液0.1ml，茚三酮乙二醇甲醚试液1.0ml，摇均，放到沸水中加热3分钟，取出，放冷至室温，加60%乙醇3ml，水稀释至刻度，摇均。用分光光度计，在570nm波长处测吸收度（结果见表-3图-2）所示。 1.4稳定性实验的选择 1.4.1提取时间的选择 把恰玛古洗净，搅碎恰玛古。取1g，精密称定用适量的水溶解并转移100ml量瓶中，于60水浴中振摇0分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，滤过取1g，精密称定，用适量的水溶解并转移至100ml量瓶中，于60水浴中振摇分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，滤过 表1 取