亚慢性和慢性毒理实验课件.ppt

亚慢性和慢性毒性试验 毒理学动物试验按染毒期限可分为四种，即急性、亚急性、亚慢性和慢性毒性试验，后三种可统称为重复染毒毒性试验。 急性毒性试验和慢性毒性试验分别代表了人一次染毒和长期反复染毒这两种暴露特征的毒性试验方法。 慢性毒性试验耗费大量的人力、物力和时间，亚急性、亚慢性毒性试验就具有预备或筛选试验的性质。 慢性毒性实验 由于人体接触外源化学物往往是长期、反复接触，利用急性毒性试验的资料难以预测慢性毒性。 ①外源化学物在长期重复染毒时可产生与急性毒性试验完全不同的毒作用。如苯急性中毒引起中枢神经系统抑制，而长期反复接触可引起粒细胞缺乏及白血病。 慢性毒性实验 ②随着动物的衰老，有些因素如组织易感性改变、代谢和生理功能的改变，以及自发性疾病等均可影响毒作用的性质和程度。 ③某些重要的疾病例如心脏病、慢性肾衰、肿瘤等均与年龄的增长有关。 当外源化学物在亚急性、亚慢性毒性试验中有严重的毒作用时，此受试物就应考虑放弃，只有在必要时才进行慢性毒性试验。 Parkinson等(1995)报告117种药品狗亚慢性(90d)和慢性(24月)毒性试验结果与大鼠(短期或长期毒性试验)的结果比较，几乎没有发现新的毒性资料。因此，Parkinson等认为，动物毒性试验长于6个月没有必要，除非是研究致癌作用。 Weil等(1969)报告，112种受试物中，大鼠染毒90d后才出现毒性效应的只有3种(占2.5％)，其他受试物均在90d内已出现毒性效应，故认为大鼠90d毒性试验即可确定受试物的未观察到有害作用水平(NOAEL)。 尽管还有争论，亚慢性毒性试验(90d亚慢性试验)已成为比较常用的重复染毒毒性试验；从科学上和经济上考虑，慢性毒性试验就倾向于和致癌试验合并进行。 亚慢性、慢性毒性试验的概念 亚慢性毒性 (subchronic toxicity) 指实验动物连续(通常1～3个月)重复染毒外源化学物所引起的毒性效应。 慢性毒性 (chronic toxiciy) 指实验动物长期染毒外源化学物所引起的毒性效应。 亚慢性和慢性毒性试验目的 1. 确定受试物亚慢性和慢性毒性的效应谱，对在急性及亚急性毒性试验中发现的毒作用提供新的信息，并发现在急性及亚急性毒性试验中未发现的毒作用； 2. 研究受试物亚慢性和慢性毒作用的靶器官； 3. 研究受试物亚慢性和慢性毒性剂量-反应(效应)关系，确定其观察到有害作用的最低剂量(LOAEL)和未观察到有害作用的剂量(NOAEL)，提出此受试物的安全限量参考值； 4. 研究受试物亚慢性和慢性毒性损害的可逆性； 5. 亚慢性毒性试验为慢性毒性试验的剂量设计及观察指标选择提供依据； 6. 确定不同动物物种对受试物亚慢性和慢性毒效应的差异，为将毒性研究结果外推到人提供依据。 亚慢性和慢性毒性试验方法 1. 实验动物的选择 2. 实验动物的染毒期限 3. 染毒途径 4. 试验分组和剂量设计 5. 观察指标 亚慢性和慢性毒性试验方法 1. 实验动物选择（品种、性别） 亚慢性和慢性毒性试验一般选择两种实验动物。一种是啮齿类，一种是非啮齿类，常用大鼠和狗。选择两种实验动物是为了降低外源化学物对不同物种动物的毒作用特点不同所造成的将实验结果外推到人的偏差。在亚慢性经皮毒性试验时，也可考虑用兔或脉鼠。 亚慢性和慢性试验选用雌雄两种性别，如某种药物临床上只用于一种性别，此时可选用单性别的动物。 2 染毒期限 慢性毒性试验要求使实验动物寿命的大部分时间染毒该受试物，因此在生命的早期开始染毒是很重要的，美国FDA要求啮齿类动物在研究开始时应小于6周龄。 同样的染毒期限对不同的试验动物，其意义不同。一般地讲，慢性毒性试验对哺乳类应为两年的时间，对啮齿类相当于终生染毒，但对兔只相当于生命期的36％，狗为20％。 慢性毒性实验的期限应依受试物的具体要求和实验动物的物种而定，工业毒理学要求6个月，环境毒理学和食品毒理学要求一年以上。如慢性毒性试验与致癌试验结合进行则染毒期限最好接近或等于动物的预期寿命。 3. 染毒途径 外来化合物的染毒途径，应当尽量模拟人类接触受试化学物质的方式，并且亚慢性与慢性毒作用研究的染毒途径应当一致。 亚慢性和慢性毒性试验常用经胃肠道、呼吸道、皮肤染毒三种途径；药物临床前毒性试验中，动物染毒途径应尽可能与人的用药途径一致。 胃肠道染毒 经胃肠道染毒毒物最好采用喂饲法，即将受试物与食物或饮水混匀，使实验动物自然摄入。 如果受试化学物质有异味或易水解时，也可以用灌胃方式染毒。 尽量减少实验人员及动物受污染的危险性 当用狗或猴进行长期实验时，不常采用喂饲染毒，因浪费量太大，通常采用胶囊或插胃管染毒。