耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌课件_1.pptVIP

青霉素（1940s） 金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病受到较大的控制 产青霉素酶，能水解β-内酰胺环，表现为对青霉素的耐药 耐青霉素酶的半合成青霉素，即甲氧西林(methicillin) 时隔两年，英国的Jevons就首次发现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistanStaphylococcusaureus,MRSA),MRSA 一、MRSA： 生物学特性：(1),营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。(2),血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。(3),甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。 典型的金葡为球型，直0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜 引起深部感染的主要致病菌之一，包括肺部感染，脑、肺、肝、肾、乳腺等脏器脓肿，骨髓炎，脓毒性关节炎，心内膜炎，败血症，脓毒病(sepsis)等 MRSA的分型 MRSA分型对追踪传染源，研究型别与感染种类，耐药性的关系有重要作用; 噬菌体分型、质粒图谱分型、免疫印迹法、血清学、凝固酶、耐药谱方法分型。现在Southern印迹法也逐渐运用于MRSA的分型。 MRSA的生物学特性 不均一耐药性 敏感亚群：30%-60% 耐药亚群：40%-70% 广谱耐药性　 对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟喹 喏酮类、磺胺类、利福平等均产生不同程度的耐药， 唯对万古霉素敏感。 MRSA的耐药机理 固有耐药　 对其他各类抗生素的耐药机制 MRSA还可通过改变抗生素作用靶位，产生修饰酶，降低膜通透性产生大量PABA等不同机制，对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟喹喏酮类、磺胺类、利福平均产生不同程度的耐药 MRSA的检测 MRSA的检出率受孵育温度、时间、培养基的pH和NaCl的浓度、菌液的数量等多种 因素的影响。且由于MRSA的不均一耐药性，给其检测带来一定的困难。 MRSA的检测 1　纸片扩散法(K-B法)　 MH琼脂厚度为4 mm，菌液调至0.5麦氏浊度，甲氧西林含量5 μg/片，35°C孵育24 h，抑菌圈≤11 mm为耐药，≥17 mm为敏感; 苯唑西林(1 μg/片)在贮存过程中药效不易降低，且对不均一耐药性检测效果更好， 抑菌圈≤10 mm为耐药，≥13 mm为敏感，11～12 mm为中介。 质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 29213(耐药菌株)，金黄色葡萄球菌ATCC 25923(敏感菌株); 优点是快速、简便、价格便宜; MRSA的检测 2　肉汤稀释(MIC)法　 MH肉汤培养基加NaCl至20 g/L浓度，同时加入Ca,Mg离子，将苯唑西林进行倍比稀释，从0.125～16 μg/ml，菌浓度为104/ml，35°C孵育24 h; MIC＜2 μg/ml为敏感，＞4 μg/ml为耐药，该法检出率可达95%; 操作较繁琐; MRSA的检测 3　琼脂稀释(MIC)法　 用含20 g/L NaCl的MH琼脂将苯唑西林倍比稀释为12个不同浓度并浇注平皿; 苯唑西林量终浓度为0.125～256 μg/ml; 菌液(0.5麦氏浊度)点种于含药平皿，35°C孵育24 h; 适用于大量菌株的MRSA检测，结果容易判断，重复性好，但耗时，费力; MRSA的检测 4　琼脂筛选法　 MH培养基加NaCl(40 g/L)加苯唑西林(6 μg/ml)，将菌液(0.5麦氏浊度)点种或画线35°C孵育24 h，只要平皿有菌生长，即使一个菌落也是MRSA， 敏感度为100%，常用作校正其它方法的标准，尤其适用于检测抑菌圈直径处于中介度的金黄色葡萄球菌。 M