基因芯片技术及其在结核分枝杆菌菌种鉴定及耐药性检测方面的研究进展.pptVIP

基因芯片技术及其在结核分枝杆菌菌种鉴定及耐药性检测方面的研究进展 基因芯片技术 基因芯片技术在结核病研究中的应用 当前面临的困难 展望 基因芯片技术 基因芯片技术原理 基因芯片的工作原理与Southern、Northern是一致的．都是应用已知核酸序列作为探针固定在玻璃等基片上．然后与待测样品的DNA或RNA互补的靶核苷酸序列杂交．从而获得待测样品的信息。 基因芯片技术优点 基因芯片技术由于同时将大量探针固定在支持物上．所以可以一次性对样品大量序列进行检测和分析．从而解决了传统核酸印迹杂交技术操作繁杂、自动化程度低、操作序列数量少、检测效率低等不足，而且，通过设计不同的探针列，使用特定的分析方法可使该技术具有多种不同的应用价值。 基因芯片制备方法 (1)芯片的制备。首先要寻找有意突变位点设计、合成探针；其次在制备基因芯片时要考虑阵列的密度、再生性、操作的简便性、成本的高低等几方面的因素。 (2)样品的制备。包括样品DNA或RNA的分离提纯和用PCR技术对靶基因片段扩增以及对靶基因标记。将样品进行提取、扩增，获取其中的蛋白质或DNA、RNA．然后用荧光标记。 (3)基因探针的固定化。 (4)杂交反应。 (5)芯片信号的检测与分析。样品中靶基因与固定在芯片上的探针发生特异性杂交而结合在芯片上的不同点．荧光素分子受特定波长的激发光照射出特定波长的荧光，杂交越完全，得到