第3章 紫外—可见分光光度法 ok.pptVIP

入射光单色性不纯 分光光度计的类型、质量, 操作人员 的人为过错均会导致入射光单色性不纯。 杂散光的影响 设杂散光强度为 Is , 测得吸光度为： A测 = lg I0+Is I + Is I I0 ， I0+Is I+Is I0 / I 即A测 A ，令 Is / I0 = S, 有： Is = S · I0 杂散光：指仪器内部通过非预定途径照射 到检测器上的额外的光辐射。 杂散光的影响 A测 = lg I0+ S · I0 I· I0/I0+ S· I0 = lg 1+S T+S 例：当 S=1.0% , T=10% ，求A测？ 当 S=0 , T=10% ，求A？ 比色杯的影响 统一材质，统一规格，成套使用。 任何分光光度计都有一定的测量误差。 （这种误差来源于光源、检测器、显示系统） 这一测量误差的总和最终表现在透光率读数T 上，设为?T。 透光率读数的影响 对同一台仪器来说 ，?T 是一常数。但由于 A= - lgT ，所以在不同的透光率读数范围内，同样大小的 ?T 所引起的吸光度误差 ?A 是不同的。 透光率读数的影响 根据朗伯-比尔定律：A 与 c 成正比关系 因此， ?A 与 ?c 也成正比关系。 ?A = K · ?c （ ?T、 ?A 、?c 均为绝对误差 ） 测定结果的误差通常用相对误差来表示： ?c/c 透光率读数的影响 ?c/c 与 A 、T 的关系 A = -lgT = εl c （1） (-0.434/T)dT=εl dc （2） 将（2）式代入朗伯-比尔定律，整理后得： 0.434 （3） TlgT ?c/c = ?T ?c/c与 T 的关系 ?c/c 36.8% T ?c/c = 0.434 TlgT ?T 0.434 A min 结 论 1. ?c/c 与透光率读数 T 有函数关系; 当 T=36.8%时 (或A=0.434)，?c/c最小。 2. 当 T 读数在 70% ～ 10% , 即 A 读数0.15～ 1.0 范围时, ?c/c 较小(5%)，并且变化不大。 3.4.2 反应条件的选择 显色反应：化合物溶液经化学反应处理后，能产 生颜色或在可见光区产生吸收。 使待测物与显色剂作用，生成有颜色的化 合物，颜色深浅与待测物浓度相关，在一 定范围内呈直线关系。 显色反应需满足以下要求 反应有较高的选择性，生成物在紫外-可见光区有较强吸光能力。 生成物组成恒定，与被测物之间必须有确定的定量关系，稳定性好，显色条件易于控制。 对照性要好，显色剂与生成物的最大吸收波长差别要在 60 nm 以上。 反应条件的选择 显色反应 ：M + nR MRn 1. 显色剂用量：作吸光度随显色剂浓 度变化曲线，选恒定吸光度值时的 显色剂用量。 反应条件的选择 2. 溶液酸度的影响：介质酸度直接影响显色剂离解程度，从而影响显色反应的完全程度。 固定溶液中待测组分与显色剂的浓度，改变溶液酸度（pH值），测定溶液A与 pH 的关系曲线，找出最适 pH 范围。 反应条件的选择 3.其他问题 反应的时间、温度、放置的时间等。 3.4.3 参比溶液的选择 溶剂空白：用溶剂做空白 试剂空白：在不加样品的条件下，加入所需试剂 和溶剂。 试样空白：除不含显色剂以外，其余成分都含有。 平行操作空白：不含待测组分。 不显色空白：改变操作条件，使显色反应不发生。 3.4.4 干扰及消除方法 干扰物的影响： 干扰物本身有颜色或与显色剂形成有色化合物； 在显色条件下，干扰物水解，析出沉淀使溶液浑浊； 与待测离子或显色剂形成更稳定的配合物，使显色反应不能进行。 3.4.4 干扰及消除方法 消除方法： 控制酸度，提高反应的选择性； 选择适当的掩蔽剂，但不能与待测离子作用； 与待测物生成惰性配合物； 选择适当的测量波长； 分离。 3.5 紫外-可见吸收光谱的应用 3.5.1. 定性分析