两虫如何提高回收率.ppt

维护 每次使用前，请检查所有的O型环是否有磨损或者损坏—如有需要请联系爱德士技术人员 每次使用前，使用高真空硅油对活塞头O型环进行润滑 润滑其他所有的O型环（浓缩管、滤器）以保证它们处于良好状态 Filta-Max自动法设备维修 在移开任何面板或者保险丝盒之前，请确认电源处于断开状态 更换保险丝 注意： 双极/中性保险丝 更换保险丝前请拔掉电源线。保险丝位于保险丝盒内，保险丝盒位于电源接口附近（安装在面板后面），使用小的平叶片或者螺丝起子将标签锁松开，打开保险丝盒。保险丝盒会部分弹出来并露出保险丝。这两个保险丝是5mm×20mm，玻璃的，型号2-Amp 250V，商标 “GMC” BUSS 延时断路保险丝。 清洗淘洗装置-- Filta-Max自动法设备 在清洁仪器前，请确认拔掉电源线。使用温和的洗涤剂擦拭所有的部件/表面，不要用软管或者高压水冲洗或者浸泡，可用清洁剂瓶手动喷洒清洗 不要喷洒后面的面板—它的通风口直接连接到里面的电气元件，后面的面板只能用湿布擦拭 清洁filta-max手/自动法设备其他配件 Filta-Max系统的配件都可以用温水或实验室洗涤剂清洁，清洗完后，用纯水擦拭所有的部件，并干燥。重新润滑所有的O型圈 警告—不能使用高压灭菌锅对Filta-Max手/自动设备的任何配件进行灭菌 管件暴露在高温下会容易变形以及不透明。 若淘洗管变形或变不透明请及时更换新的配件以免造成两虫挂壁，影响回收率 3980-00 * ? 2005 IDEXX Laboratories, Inc. All rights reserved. 隐孢子虫和贾第鞭毛虫培训班如何提高回收率 取样 流速控制在1-2L/min 清洗容器应使用纯水，不要使用清洁剂 样品浓缩 离心机应放在牢固的工作台或地板上，尽量减少晃动 离心管连同适配器一起配平，保证误差在0.5g以内，尽量减少摆动 离心机设定2000g离心力，工作时间15分钟 离心机应选用无刹车系统的（自然停止大约需7分钟） 吸取上清液 需要一个蠕动泵 也可选用真空泵，最大真空度小于3.3kPa 流速控制在200ml/分钟(+/-20ml) 应在管进口处装一个移液枪头(例如：5ml 移液枪头) 来减少进口的真空力度 最终留有5-8ml液体(可以预先在需要体积处做好标记) 枪头口应该在离心管中心接近液面处吸取上清，以减少沉淀的损失 从离心管内移出液体 从离心管吸出所有液体前应先用淘洗液润洗移液管，避免目标菌贴壁 加入磁珠前应先涡旋搅拌20秒钟 用纯水充分冲洗离心管壁，冲洗两次。例如：如果转移上清液体积为7ml, 则进行两次冲洗，每次使用1.5ml纯水 每次冲洗后都要涡旋20秒再移出液体 免疫磁分离 加入100ul 两虫磁珠时需注意：放在搅拌机上搅拌15秒，并且确保底部没有剩留磁珠 把L10管放在DYNAL MX1混合器上室温15-20RPM转速孵育1小时，此过程不可以停止，如果停止则需要重新定时孵化1小时 当L10管放在磁极上呈90度角转动时此动作一定不要过快 将L10管内的混合物用1xSLBufferA冲洗两-三次，总体积为1ml ，混匀，然后转移到1.5mlEP管中（如果是多个管一起时，要马上加入1xSL BufferA，以免磁珠变干） 将MPC-S磁极保持180度转动1分钟，吸出上清液。注意：包括盖子里面的液体也要吸出，完成一个后要摇匀后再吸第二个 酸解 使用标准配置的溶液 对配置的溶液进行常规的校准，以保证所使用的部分达到正确的中和 移液枪在使用之前应校准，以保证移取的体积准确 所有的这些步骤都是为了防止酸解离过程中pH不平衡 样品干燥 建议样品自然过夜干燥 样品应该干燥完全 尽量避免使用温箱干燥玻片，除非温箱温度可以准确控制在35?C (+/- 2?C) 染色 应加50μl无水甲醇到玻片上，直至风干完全 免疫荧光染色过程应在一个潮湿的容器中，请按照操作手册进行 应按照规定准备好所需DAPI试剂 免疫荧光染色和DAPI染色后, 请务必用PBS (pH7.4)或者染色试剂盒提供的缓冲液冲洗玻片，以除去多余的染料 可中断的过程及保存时间 样品分析步骤 最大允许中断时间 样品采集、过滤、淘洗 72小时 离心 一个工作日 免疫磁分离 转移至载玻片 样品干燥 72小时 染色 镜检 7天（但需封片保存，并放置在避光处） Filta-Max xpress 两虫快速法设备维护 每个样品淘洗完 用酒精擦洗QC干体 根据《生活饮用水卫生标准》中规定清洗分流调节器和滤器。即用6%次氯酸钠浸泡半个小时后用纯水冲洗干净，晾干待用 每批样品淘洗前、后 请一定用纯水代替淘洗液，按照淘洗步骤清洗设备内部管路 每天