纳米羟基磷灰的制备及其用于细胞中过氧化氢的测定.pdfVIP

fIlll l Il1)IllI III IIIIII 摘要 ＼1923917 摘要 细胞在代谢过程中不断产生各种活性氧(reactive oxygen 其中H202是最为稳定的一种ROS。研究发现过氧化氢在细胞代谢过程中扮演着重要 的调节作用，它可与细胞内的生物大分子反应，引起细胞膜脂质过氧化、细胞内蛋白 质和酶变性、DNA损伤等，最终导致细胞死亡、组织损伤、心血管疾病、肿瘤及神 经元退变等多种疾病的发生。因此建立一种简单快速的方法用于H202浓度的检测， 对临床疾病的预防、诊断和监控具有重要意义。本论文研究了纳米羟基磷灰石、辣根 过氧化物酶一纳米羟基磷灰石(硼婢一地谨)复合物的制备并将其用于细胞中H202的 测定。主要内容如下： 淀方法制备了纳米羟基磷灰石：采用X射线衍射()a如)、透射电子显微镜(TEM)、 nm， 宽约为20．-,25nln，并且晶粒分散较好，没有严重的团聚现象；SEM表明HAP具有 良好的三维孔状结构。 2．辣根过氧化物酶(硪强)在纳米羟基磷灰石(HAP)表面的固定、直接电化学 显示，HRP固定在HAP表面后能够进行有效的直接电子转移，其循环伏安曲线上不 mV和 仅表现出一对良好的、几乎对称的氧化还原峰，氧化、还原峰电位分别为-338 -401mV(vs．SCE)，式量电位伊’为一370mV，且几乎不随扫速的变化而变化，表观 4-O．78 电子传递速率常数厩为3．77 S-1，说明HAP纳米材料能够提供一个很好的微环 还原的电催化作用。结果表明，在电位为_400mV时，瑚计一HAP／GC电极对H202 S，催化电流与H202浓度在5 mmol／L 具有最佳的响应，响应时间约为2 Bmol／L-4)．82 的范围内呈线性相关(相关系数为0．998)，最低检测限达到了O．1lmaol／L。此外，该 电极还可用于实际样品中过氧化氢的检测。 I 摘要 nmol／L。 中H202的测定，根据响应电流与浓度的关系曲线得出细胞内H202浓度约为8 同时，用该电极研究了N-甲酰屯一甲硫氨酰_L一亮氨酰—L一苯丙氨酸三肽(fMLP) rain时达到了最大值(约为17 随着时间的延长，细胞中H202释放量逐渐增大，在30 nmol／L)，之后浓度逐渐降低。表明该方法可用于细胞内H202释放的动力学过程研究。 关键词：纳米羟基磷灰石，辣根过氧化物酶，过氧化氢，RAW264．7细胞 n Abstract Abstract Reactivespecies(ROS)，includinghydroxyl anions oxygen inlife