青霉素酰化性质及应用研讨.pdfVIP

摘 要 本论文研究了有机溶剂、温度、pH值对工业上广泛应用的青霉素酰化酶活 性的影响，优化反应条件，如反应介质、温度、pH值、底物浓度等因素，研究 了青霉素酰化酶在催化合成阿莫西林中的应用。主要进行了如下工作： 1．根据LogP规律筛选出12种有机溶剂，考察了它们对青霉素酰化酶活性的影 响。在pH值等于7的缓冲溶液和有机溶剂各占50％(V／V)的体系中，通过 测定酶在此体系中活性的变化，选出对酶活性影响较小的有机溶剂。发现丙 三醇、乙二醇、二甲基亚砜等有机溶剂对酶活性影响较小；研究了温度及pH 值对青霉素酰化酶活性及稳定性的影响，发现在20℃～55℃的范围内，随着 温度升高，酶的活力增大，但酶的稳定性逐渐降低，综合得出温度为40℃时 酶的活性及稳定性较好；pH值在6~8的范围内变化时，酶的活力先升高后下 降，pH值等于7．5时，活力达到最大，而酶稳定性却随着pH值增大而下降， 综合得出pH值为6．5或7时酶的活性及稳定性较好。 2．从对羟基苯甘氨酸邓钾盐出发制备了对羟基苯甘氨酸甲酯Q．OH．PGME)，红 外和熔点分析表明，制备的产物纯度较高。测定了对羟基苯甘氨酸甲酯 (p．OH．PGME)在7_,--醇，1，4．丁二醇，环己烷，正丁醇，丙三醇，叔丁醇等几 种溶剂中的表观溶解度，发现对羟基苯甘氨酸甲酯(p—OH．PGME)在正丁醇， 乙二醇等溶剂中的表观溶解度较好，底物的溶解性好在酶催化合成p一内酰胺 抗生素反应中有利于向合成方向进行。 3．优化了青霉素酰化酶催化合成阿莫西林的反应条件，分别考察了温度、pH值、 底物浓度以及不同反应介质时，6-APA的转化率和对羟基苯甘氨酸甲酯 (p．OH．PGME)的水解率，得出较理想的反应条件为：乙二醇．缓冲溶液体系、 mmol／L、原料浓度 温度为20℃、溶液pH值为6．5、底物6-APA浓度为75 配比：6-APA：p．OH．PGME为1：2。 关键词：青霉素酰化酶有机溶剂活性稳定性合成 ABSTRACT Theeffectof and valueonthe ofthe organicsolvent,temperaturepH activity industrialused G studiedinthisthesis．The widelypenicillin acylase(PGA)were reaction thereaction valueandthe conditions，includingmedium,temperature，pH concentrationof andusedinthe ofamoxicillion substrate，wereoptimized synthesis withPGA workshave asthe beendone： catalytist．Thefollowing 1．Some solventsselected tOthe were lawof thefurther organic according lo妒for abouttheireffectonthe ofPGA．The solvent investigation activity preferable