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15.埃希菌属
肠道杆菌 埃希菌属 埃希菌属 种类 大肠埃希菌 蟑螂埃希菌 弗格森埃希菌 赫尔曼埃希菌 伤口埃希菌 形态染色 革兰阴性短杆菌,多数有周鞭毛,有荚膜或微荚膜,有菌毛,均无芽孢 培养特性 兼性厌氧 营养要求不高 圆形光滑菌落 菌落特征 SS平板--红色菌落 Mac平板--红色菌落 EMB平板--紫黑色有金属光泽菌落 生化反应 氧化酶试验(-) 分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等,(个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖) KIA:AA+- MIU:++- IMViC:++-- 抗原结构 抗原种类:O、H、K抗原 意义:表示大肠埃希菌血清型 血清型表示式:O:K:H 举例:O111:K58:H2 抵抗力 胆盐、煌绿对该菌有抑制作用 对氯霉素、链霉素、庆大霉素敏感,但易产生耐药性 临床意义 致病物质:K抗原、菌毛、内毒素、肠毒素(LT、ST) 所致疾病: 肠外感染:多为机会感染,表现为泌尿系感染(多见),胆囊炎、腹膜炎等 肠内感染:由致病大肠埃希菌引起,表现为腹泻。 微生物学检验 标本采集: 肠外感染:根据病变部位不同采集不同标本,如血液、尿液、分泌物等 肠内感染:采集新鲜粪便 检验程序 肠内感染 检验程序 肠外感染 检验方法-肠外感染 标本直接涂片镜检 分离培养:标本接种血平板和Mac 或 EMB 平版 经18~24小时培养,挑取可 疑菌落作进一步鉴定。血标本先 增菌,再分离培养。 检验方法-肠内感染 分离培养:粪便标本接种Mac 或 EMB平版 ,经18~24小时培养,挑取可疑菌 落作进一步鉴定。 生化反应:KIA、MIU、IMViC符合大肠埃 希菌. 致病大肠埃希菌鉴定. ETEC的鉴定 生化反应符合大肠埃希菌 毒素检测 EPEC的鉴定 生化反应符合大肠埃希菌 血清学分型 先用多价诊断血清做玻片凝集试验,如凝集再用单价诊断血清确定血清型 EIEC的鉴定 生化反应特点(与志贺菌相似) 发酵葡萄糖产酸不产气 不发酵或迟分解乳糖 多数菌株动力阴性 与志贺菌的鉴别: 毒力测定:豚鼠眼结膜试验 血清学分型:O152、O124 EHEC的鉴定 生化反应符合大肠杆菌 血清学分型:有50多个型,代表为O157:H7 O157:H7不发酵山梨醇,有助于选择性分离培养 鉴定依据 在肠道选择平板上为发酵乳糖的有色菌落 在KIA上多为+++- IMViC为++-- 尿酶试验- 致病性大肠杆菌需作血清学鉴定或毒力测定 LT与ST的比较 致病大肠埃希菌种类 大肠埃希菌生化反应结果 与志贺菌的鉴别 * * 粪 便 肠道弱选择培养基 分解乳糖菌落 ETEC 生化反应 毒素测定 EPEC EIEC EHEC 与O、K多价诊断血清做 玻片凝集试验 生化反应和血清学分型 脓、尿、脑脊液等 革兰染色镜检 接种血平板 分离培养 可疑菌落 生化反应 氧化酶、KIA MIU 报告结果 血液 增菌 菌落涂片染色 基因探针 ELISA 乳鼠灌胃试验 家兔或小白鼠肠袢试验 ST 基因探针 固相放免 ELISA 皮肤毛细血管通透性试验 家兔或小白鼠肠袢试验 LT 分子生物学法 免疫学法 生物学方法 方法 活化细胞鸟苷酸环化酶,细胞内cGMP含量升高,分泌功能亢进,引起腹泻 活化细胞腺苷酸环化酶,细胞内cAMP含量升高,分泌功能亢进,引起腹泻 致病机理 肠黏膜GM1神经节苷酯 肠黏膜GM1神经节苷酯 B亚单位受体 无 有 免疫原性 耐热 不耐热 耐热性 较小,1500~5000 较大,73000 分子量 耐热肠毒素 不耐热肠毒素 特性 黏附、毒素 婴儿腹泻、水样便、脱水 小肠 EAggec 志贺样毒素(VERO毒素) 出血性结肠炎等 结肠 EHEC 黏附、内毒素破坏细胞 志贺样腹泻,脓血便 结肠 EIEC 病菌黏附、破坏细胞 婴幼儿腹泻、水样便发热、呕吐 小肠 EPEC LT、ST 旅行者腹泻、婴幼儿腹泻、水样便、腹痛等 小肠 ETEC 致病机制 疾病与症状 侵袭部位 菌株 - - - + + - + +/- - + A K - - - + + - + - - - A K - - - + + - + + - - A K 吲哚 - - - + + - + +/- - +/- A A 氧化酶 C Vi M I 尿酶 动力 H2S 气体 底层 斜面 IMViC MIU KIA * * * * *
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