胸腺五肽酶降解机制的的研究.docVIP

PAGE PAGE 2胸腺五肽酶降解机制的研究 摘要：目的 研究TP5在胃肠道中的酶降解机制。方法考察TP5在人工胃液、人工肠液、纯酶（氨肽酶、羧肽酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶）以及离体肠环中的降解，并探讨TP5浓度、酶抑制剂及pH 值对降解的影响。结果 TP5在人工胃液中稳定，在人工肠液中迅速降解，具有浓度依赖性及pH依赖性，即浓度越高，pH值越低，则降解速率越低。同时酶抑制剂（EDTA、1,10-菲啰啉）可显著地抑制其降解，但杆菌肽的抑制作用不显著。TP5在羧肽酶、氨肽酶及胰蛋白酶中的降解速率分别为13.43, 12.82, 5.11 ml/min，但在α－糜蛋白酶中几乎不降解。此外，TP5的降解具有显著的部位特异性，在结肠部位的降解速率最低。结论 TP5易被胃肠道中的酶降解破坏，口服无效。为了开发口服给药系统必须将TP5包载于适宜的载体之中。关键词：胸腺五肽 胃肠道 酶降解 中图分类号: R943　　　文献标识码:A　　　文章编号: Study on the mechanism of enzymatic degradation of thymopentin 资金项目：国家自然科学基金 (No..作者简介：郑爱萍 女 博士生 通讯作者：张强 男 教授 博士导师 E-mail： HYPERLINK mailto:zqdodo@ zqdodo@[ABSTRACT] OBJECTIVE To evaluate the enzyme degrading mechanism of TP5 in GI tract. METHODS A systemic research on TP5 degradation were carried out in artificial gastric juice, artificial intestinal juice, pure enzyme (carboxypeptidase A, aminopeptidase N, trypsin, α-chymotrypsin) and everted intestinal rings. RESULTS TP5 was stable in artificial gastric juice, but rapidly degraded in artificial intestinal juice, which dependent on TP5 concentration and pH value， that is the higher concentration and lower pH value, the lower degradation clearance. Furthermore, enzyme inhibitors such as EDTA and 1,10-phenanthroline could significant inhibit the degradation of TP5, but bacitracin had not significantly different effect. In the presence of pure enzyme, the degradation clearances were 13.43, 12.82 and 5.11 ml/min for carboxypeptidase A, aminopeptidase N and trypsin, respectively. However, TP5 could not be degraded by 资金项目：国家自然科学基金 (No..作者简介：郑爱萍 女 博士生 通讯作者：张强 男 教授 博士导师 E-mail： HYPERLINK mailto:zqdodo@ zqdodo@KEY WORDS: thymopentin; gastrointestine; enzyme degradation随着基因工程药物及生命科学研究的进展，蛋白质和多肽类药物已成为生物技术新药的主要品种，同传统的化学合成药物相比，该类药物与体内正常生理物质十分接近，药理活性高，但是其体内、体外稳定性差，生物半衰期短，需要频繁用药，给病人带来痛苦和不便，因此许多研究者致力于非注射给药途径的研究，包括鼻腔、口腔、直肠、肺部给药等，其中口服给药是患者最易接受的给药途径，顺应性好，方便、快捷，因此蛋白质、多肽类药物口服给药系统得到了广泛的研究[1-4]。蛋白多肽类药物口服吸收的主要障碍是药物的水溶性导致的不易跨脂质膜吸收以及药物易被消化道中的酶降解失活，尤其对于小分子的肽类，在胃肠道中更容易被降解