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氮素形态对半夏植株氮代谢及主要化学成分影响 　　[摘要] 目的：研究氮素形态对半夏植株氮代谢及主要化学成分的影响。方法：采用无土栽培半夏，同一氮素水平不同氮素形态处理，测定半夏不同部位硝酸还原酶（NR）、谷氨酰胺合成酶（GS）活性，铵态氮（NH4+-N）、硝态氮（NO3--N）含量，块茎中总游离有机酸、生物碱、鸟苷含量，统计半夏珠芽和块茎产量。结果：随NH4+-N/NO3--N的上升，半夏NR活性呈下降趋势；叶片、叶柄及块茎中硝态氮含量呈先升后降的趋势，根中硝态氮含量呈下降趋势；叶片、叶柄及根中GS活性呈上升趋势，块茎中GS活性呈先升后降趋势；叶片、块茎及根中铵态氮含量先升后降，叶柄中铵态氮含量呈上升趋势。NH4+-N/NO3--N为75∶25时，块茎、珠芽及合计产量均最高。全硝态氮营养下，块茎中总生物碱和鸟苷质量分数最高，分别为0.245%，0.019 7%。铵态氮和硝态氮配比为50∶50时，半夏总有机酸质量分数最高，达到了0.7%以上；全硝态氮处理下，总有机酸含量最低。结论：铵态氮、硝态氮复合施用对半夏植株氮代谢指标、产量和主要化学成分影响显著。 　　[关键词] 半夏；氮素形态；氮代谢；化学成分 　　半夏Pinellia ternata （ Thunb.） Breit.为天南星科半夏属多年生草本植物[1]，以其干燥块茎入药，为常用中药材。目前，半夏的研究主要集中在化学成分、药理及生物技术等方面，但关于不同氮源配施对半夏氮代谢以及化学成分积累的影响尚少见报道。硝态氮（NO3--N）和铵态氮（NH4+-N）是氮素的2种主要形态，不同药用植物对不同氮素形态的吸收具有选择性，不同氮素形态对不同药用植物含氮物质代谢的影响也不同，对药用植物产量和品质具有重要影响。目前，国内外关于不同氮素形态及配比对药用植物生长发育、品质和产量的影响已有大量报道，如裴文梅等研究出合适的铵态氮和硝态氮配比能提高甘草的有效成分和产量[2]等。本试验采用无土栽培法，研究了同一氮素水平下不同铵态氮和硝态氮配比对半夏产量、氮代谢以及化学成分积累的影响，以期为半夏氮肥的合理施肥提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验设计 　　供试材料为江苏省泰州地区的泰半夏，选择形态一致、大小相近的块茎为繁殖材料。经南京农业大学中药材研究所唐晓清副教授鉴定为天南星科植物半夏P.ternata。半夏块茎栽培于南京农业大学实验大棚内，盆高18 cm×直径15 cm，基质为蛭石，每盆装基质重865 g，每盆播种10个块茎，播种深度6 cm，置于遮阳网下，管理措施一致。 　　采用不同NH4+-N/NO3--N单因素处理，在无土栽培配方液的基础上，总氮量一致（N浓度为10 mmol·L-1）的条件下，设5个不同NH4+-N/NO3--N处理，即0∶100，25∶75，50∶50，75∶25和100∶0，其中NH4+-N由（NH4）2SO4提供，NO3--N由Ca（NO3）2提供，每个处理重复5次，随机排列。无土栽培配方液中微量元素采用阿农营养液配方，基本营养液pH 6.0。在所有营养液中均加入7 μmol·L-1硝化抑制剂二氰胺（DCD），以防止营养液中NH4+转化为NO3-。处理液自2011年9月3日始，每10 d浇1次，每次每盆200 mL，直至倒苗。 　　1.2 测定项目 　　1.2.1 氮代谢各项指标测定 在各处理长势一致的成熟植株中，随机选择10 株，分别取其中间叶片、叶柄、块茎和根为测定材料。取样后，NR 活性采用硝酸还原酶活力的活体法测定[3]，将新鲜材料叶柄、叶片，根剪成1 cm 小段，块茎切为0.5 cm×0.5 cm的小块放入0.1 mol·L-1磷酸缓冲液（pH 7.5）中，反复抽气至叶片完全软化沉底后，置于25 ℃下黑暗保温30 min，加入1%三氯乙酸终止反应，磺胺显色，波长540 nm测定吸光值，酶活性单位以μg·g-1·h-1，FW表示。硝态氮含量采用水杨酸法测定[3]。每个处理重复3次。铵态氮含量测定采用茚三酮显色法[4]。GS活性的测定采用南京建成生物工程研究所的试剂盒（A047）进行测定。 　　1.2.2 生物量的测定 倒苗后，每个处理随机采样20株，洗净，统计块茎和珠芽鲜重，半夏块茎于105 ℃杀青10 min，55 ℃烘干至恒重。 　　1.2.3 总有机酸、总生物碱及鸟苷含量测定 块茎打粉过60目筛，测定半夏中总有机酸、总生物碱及鸟苷含量。总游离有机酸含量测定采用电位滴定法[2]。总生物碱含量测定采用酸性染料比色法[5]。 　　鸟苷含量测定采用高效液相色谱法测定，岛津高效液相色谱仪（LC-20AT），色谱条件：C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（3∶97），检测波长为254 nm。待测样品提取采用超声提取法。